VcMMAE缬氨酸-瓜氨酸-MMAE连接子在细胞和动物实验的应用

2026-07-29

VcMMAE 缬氨酸-瓜氨酸-MMAE连接子-载荷偶联物（货号：56330ES）是由可裂解二肽连接子（Val-Cit）与微管抑制剂 MMAE（单甲基澳瑞他汀 E）偶联而成的 ADC 核心组分。Val-Cit 二肽连接子可被肿瘤细胞内高表达的组织蛋白酶 B 特异性裂解，实现载荷的肿瘤微环境可控释放。MMAE 作为澳瑞他汀家族的代表分子，通过抑制微管蛋白聚合阻断细胞有丝分裂，IC₅₀可达纳摩尔级别。VcMMAE 是目前应用最广泛的 ADC 连接子 - 载荷组合之一，已在多款上市 ADC 药物中成功应用。

VcMMAE在细胞和动物实验上的应用参考：

一、细胞实验（体外实验）浓度

1. 游离 VcMMAE（未偶联抗体）的细胞毒性

细胞系	IC₅₀（nM）	备注
SKBR3（人乳腺癌）	410.54 ± 4.9 nM	72 h MTT法
HEK293（人胚肾）	482.86 ± 6.4 nM	72 h MTT法
U87MG（人胶质瘤）	58 nM	市售VcMMAE
多种FGFR表达细胞	40–580 nM	FGF1V–vcMMAE缀合物实验，随FGFR表达水平变化

说明：游离VcMMAE因连接子需经溶酶体酶切才能释放MMAE，因此细胞毒性远低于游离MMAE（后者的IC₅₀通常在0.1–4 nM级别）。

2. 以VcMMAE为弹头的ADC（偶联抗体后）的细胞毒性

ADC名称	靶点	细胞系	IC₅₀
OFA-vcMMAE	CD20	CD20阳性淋巴瘤细胞	5 pg/mL - 4.1 ng/mL（≈0.0038-3.1 nM）
Herceptin-vcMMAE	HER2	SK-BR-3	80.2 nM（7 nM时活力降低30%）
PSMA-1-VcMMAE	PSMA	PC3pip（PSMA阳性）	效力是阴性细胞的48倍
HB22.7–vcMMAE	CD22	多种B细胞NHL系	0.02–0.285 µg/mL
抗TF–vcMMAE	组织因子	胰腺癌细胞	1.15 nM - >200 nM（随细胞系不同）
Trastuzumab-vcMMAE（TRA-bisAlk-vc-MMAE）	HER2	BT-474	抗原阳性细胞中效力强，抗原阴性细胞中低约3个数量级

3. 游离MMAE（VcMMAE的活性代谢物）的参考浓度

细胞系	IC₅₀（nM）
U87MG（胶质瘤）	0.1 nM
BxPC-3（胰腺癌）	0.97±0.10 nM
SKBR3（乳腺癌）	3.27±0.42 nM
KB、A549、DU145等	0.19-0.59 nM
SKOV3、A549、L1210	0.66-2.1 nM

二、动物实验（体内实验）剂量

1. 以VcMMAE为弹头的ADC给药剂量

ADC名称	动物模型	给药方案	剂量	关键结果
cAC10-vcMMAE	L-82异种移植小鼠	腹腔注射	0.5、1、3 mg/kg	3 mg/kg时抗肿瘤活性最强
cOKT9-vcMMAE	L-82异种移植小鼠	腹腔注射	0.5、1、3 mg/kg	剂量依赖性抑制肿瘤，肿瘤内MMAE浓度与剂量正相关
HB22.7–vcMMAE	DoHH2、Granta 519异种移植小鼠	单次剂量	单次给药	几乎全部小鼠实现持久完全反应，毒性极低
16A-MMAE（抗MUC1）‍	H838异种移植小鼠	静脉注射，2次	3 mg/kg有效，1 mg/kg为最低有效剂量（单次或两次）	剂量依赖性抑制肿瘤生长
TRA-bisAlk-vc-MMAE	BT-474异种移植SCID小鼠	每4天一次×最多21天	10、20、30 mg/kg	10 mg/kg肿瘤消退但未清零；20和30 mg/kg 10/10肿瘤清零
Fab_TRA-bisAlk-vc-MMAE	BT-474异种移植SCID小鼠	隔天给药×25天	20 mg/kg	显著延迟肿瘤生长（中位TTE延长48.7天）

2. 游离MMAE参考剂量

模型	给药方案	剂量	结果
BT-474异种移植小鼠（游离MMAE对照）	隔天给药	0.3 mg/kg	仅边缘性肿瘤生长延迟（TGD=4.2天）
BT-474异种移植小鼠（游离MMAE对照）	—	0.4 mg/kg（同方案）	同样仅边缘效果