Mc-Val-Ala-PAB 马来酰亚胺-缬氨酸-丙氨酸-PAB连接子在细胞和动物实验的应用

2026-07-29

Mc-Val-Ala-PAB 马来酰亚胺-缬氨酸-丙氨酸-PAB连接子（货号：58256ES）是一种常用的可裂解 ADC 连接子，由马来酰亚胺（Mc）反应基团、Val-Ala 二肽酶切位点、以及对氨基苄氧羰基（PAB）自降解间隔基组成。马来酰亚胺基团可与抗体半胱氨酸巯基高效偶联，Val-Ala 二肽可被细胞内组织蛋白酶特异性切割，PAB 基团则实现载荷的自降解释放。该连接子具有良好的血清稳定性与高效的胞内裂解效率，是 ADC 药物开发的经典连接子选择。

Mc-Val-Ala-PAB在细胞和动物实验上的应用参考：

Mc-Val-Ala-PAB本身是连接子组件（linker），不具有细胞毒性，它需与抗体和毒性载荷（如MMAE、DXd、Exatecan等）组装成完整的ADC后才能发挥生物学效应。因此，其"应用浓度"本质上是以Mc-Val-Ala-PAB为连接子的ADC全分子的给药/处理浓度。

一、细胞实验（体外实验）浓度——Val-Ala连接子类ADC

1. 以MMAE为载荷的Val-Ala连接子ADC

ADC/载荷	细胞系	IC₅₀	备注
抗HER2-Val-Ala-MMAE ADC	HER2+乳腺癌细胞	92 pmol/L（≈0.092 nM）‍	使用Val-Ala连接子，效力低于Val-Cit ADC（14.3 pmol/L）
非可裂解（对照）ADC	同一HER2+细胞	609 pmol/L	Val-Ala ADC比非可裂解ADC细胞毒性更强
Cys-linker-MMAE（非可裂解类似物）‍	多种癌细胞	10⁻¹¹ mol/L（≈0.01 nM）‍	活性代谢物与游离MMAE细胞毒性相似

2. 含Val-Ala连接子ADC的体外实验浓度参考范围

· 靶抗原阳性细胞：0.01–100 nM（取决于靶点表达水平和载荷种类）

· 靶抗原阴性对照细胞：至少高1-3个数量级用于验证特异性

· 处理时间：通常72–96小时（MTT/CCK-8法评估）

二、动物实验（体内实验）剂量

1. Val-Ala连接子类ADC体内疗效剂量

ADC/载荷	动物模型	给药剂量	结果
含Val-Ala连接子ADC（MMAE载荷，ABL Bio报道）‍	裸鼠异种移植模型	1 mg/kg（单次静脉注射）	显著抑制肿瘤生长
含Val-Ala连接子ADC（MMAE载荷，ABL Bio报道）‍	裸鼠异种移植模型	2.5 mg/kg（单次静脉注射）	更强抗肿瘤活性
非可裂解型ADC（Val-Ala类连接子、MMAE载荷）‍	异种移植小鼠模型	2.5 mg/kg	显著抗肿瘤活性；MTD达160 mg/kg，是Val-Ala含可裂解ADC的约2倍
HLX85（Dxd载荷，含Val-Ala类连接子）‍	Capan-1 CDX小鼠模型	1 mg/kg（单次）	诱导显著肿瘤消退
HLX85	胃腺癌PDX模型（MMAE-ADC耐药）	8 mg/kg（单次）	实现深度肿瘤缓解
HLX85（非人灵长类安全性）‍	食蟹猴	HNSTD ≥40 mg/kg	优异耐受性，线性PK

2. 体内给药剂量参考范围总结

·有效药效学剂量：1–10 mg/kg（单次或多次静脉注射）

·常规起始剂量：1–3 mg/kg

·最大耐受剂量参考（新型Val-Ala类ADC）‍：可达40–160 mg/kg

三、关键说明与使用建议

1. Mc-Val-Ala-PAB是连接子，不是活性药物：实验中不能直接使用Mc-Val-Ala-PAB处理细胞或动物。它需要偶联抗体和细胞毒性载荷（如MMAE）后，以完整ADC形式进行实验。

2. Val-Ala vs Val-Cit连接子差异：

体外细胞毒性：Val-Ala ADC（IC₅₀≈92 pmol/L）低于Val-Cit ADC（IC₅₀≈14.3 pmol/L），因Val-Ala连接子酶切效率较低
体内稳定性：Val-Ala连接子在体内更稳定，血浆中释放率更低，因此体内药效和安全性可能更优
安全性：Val-Ala连接子不易被人中性粒细胞弹性蛋白酶切割，理论上有更低的中性粒细胞减少症风险

3. 溶解性：Mc-Val-Ala-PAB可溶于DMSO；体内给药时可用DMSO + PEG300 + Tween 80 + 生理盐水配制。

4. 实验设计建议：