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Hoechst 33258类似物属于活细胞核标记的Hoechst系列染料，可穿透细胞膜结合活细胞或固定细胞的核酸。它通过结合DNA双链小沟发挥作用，偏好富含A/T的DNA链，且这类DNA能让其荧光强度显著增强，同时溶液pH升高也会提升其荧光强度。
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