本品是一款可用于重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification, RPA）的原料，利用重组酶、单链DNA结合蛋白和链置换DNA聚合酶等开发出的一种适用于RNA核酸检测的恒温扩增原料，搭配客户设计的Nfo探针等，即可通过测流层析试纸条进行检测结果判读。

本品是在电泳型RPA原料的基础上，加入了核酸内切酶Ⅳ（endonuclease Ⅳ，即nfo，Cat#14543ES），客户只需设计nfo探针和生物素标记的反向引物，扩增过程中当nfo探针与模板链互补时，核酸外切酶Ⅳ识别并切割THF残基位点，获得既有探针标记物又有引物标记物的扩增子，只需加入对应的标记抗体，即可观察到试纸条检测线上的结果条带。

1、T4 Uvs X、T4 Uvs Y、GP32、Bsu DNA Polymerase、CK等多酶参与；

2、恒温37-42℃反应10~30 min，即可将少量核酸分子扩增到可检测水平；

3、检测灵敏度可达单个拷贝和数十个拷贝或更少的RNA；

4、对仪器依赖程度低，操作简便、结果判读简单；

5、广泛应用于体外诊断、兽医、食品安全、生物安全、农业等领域。

1、引物设计

推荐引物设计长度在30-35bp之间，引物设计过程中应当尽量避免形成复杂的二级结构，下游引物5’端需要进行标记（所用的试纸条相匹配，例如生物素、地高辛等），最终扩增产物的长度推荐在100-500bp之间。

2、 分子探针设计

       分子探针长度约46-52个核苷酸，其中5’端距离THF位置约30-35 bp，3’端距离THF位置约15 bp。探针的5’端用一种抗原标记物标记，通常为FAM基团或羧基荧光素；内部含有碱基核苷酸类似物替换核苷酸（例如四氢呋喃残基THF）； 3’末端有聚合酶延伸阻断基团（例如C3-spacer，磷酸基或双脱氧核苷酸）。

注意：THF标记是取代序列中的碱基，并非额外插入THF标记；在开始实验前检查探针5’端标记的基团与下游引物5’端标记的基团是否与所用的试纸条相匹配。

-25~-15℃保存，有效期1年；试剂请提前分装。