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Hieff® Multiplex PCR Kit
产品货号:13279ES50
产品规格:100 T
产品价格:¥875.00
类别:多重PCR

说明书下载

  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Hieff® Multiplex PCR Kit

    13279ES60

    100 T

    875.00

    Hieff® Multiplex PCR Kit

    13279ES76

    500 T

    3165.00


    产品描述

    本产品适用于多重PCR实验。Hieff® Multiplex PCR Kit以多重PCR酶制剂与2×扩增缓冲液为组分的试剂盒,可快速便捷地用于PCR反应,具备高均一性、高特异性和高灵敏度的特点,可以对20对及以上的引物特异、均一地进行扩增反应。


    产品组分

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    12279ES60 (100 T)

    12279ES76 (500 T)

    12279-A

    Hieff® Multiplex PCR Enzyme

    2×50 μL

    10×50 μL

    12279-B

    2×Hieff® Multiplex PCR Buffer

    2×1.25 mL

    10×1.25 mL

    【注】:12279-A组分避免反复冻融。


    运输与保存

    冰袋运输。-20℃储存,有效期1年。


    反应体系

    组分

    体积 (μL)

    终浓

    2×Hieff® Multiplex PCR Buffer

    25

    Hieff® Multiplex PCR Enzyme

    1

    -

    Primer mix

    x

    0.1 μM-0.5 μM

    模板DNA

    DNA总量:1 ng-200 ng

    -

    无菌超纯水

    up to 50

    -

    【注】 

    1)上表中DNA量和引物浓度均为推荐浓度,可根据具体实验情况进行调整最适浓度。

    2)每条引物的浓度可在0.1 μM-0.5 μM范围内进行调整。

    3)2×Hieff® Multiplex PCR Buffer中已经包含扩增所需要的Mg2+dNTP、盐离子等,无需额外添加。


    扩增程序

    循环步骤

    温度(

    时间

    循环数

    预变性

    94

    1 min

    1

    变性

    94

    30 sec

    15-45

    退火

    50-60

    60 sec

    延伸

    72

    60 sec/kb

    终延伸

    72

    10 min

    1

    【注】

    1)在PCR仪上设置上表中的反应程序进行多重PCR反应(设置热盖温度至105℃左右)

    2)使用本产品获得的扩增产物无需添加上样缓冲液,可直接上样用于电泳检测。

    3)延伸时间以最长扩增片段为准,可适当延长延伸时间,但要避免过长时间带来的非特异性扩增。


    实验案例分享

    以人基因组DNA为模板,使用10对引物进行多重PCR反应,分别扩增97 bp、139 bp、181 bp、212 bp、268 bp、331 bp、415 bp、507 bp、741 bp和1172 bp的目的片段。


    反应体系配制

    组分

    体积 (μL)

    终浓

    2×Hieff® Multiplex PCR Buffer

    25

    Hieff® Multiplex PCR Enzyme

    1

    -

    Primer mix

    10

    0.1 μM

    模板DNA

    1

    2 ng/μL

    无菌超纯水

    up to 50

    -


    扩增程序

    循环步骤

    温度(

    时间

    循环数

    预变性

    94

    1 min

    1

    变性

    94

    30 sec

    35

    退火

    60

    60 sec

    延伸

    72

    60 sec/kb

    终延伸

    72

    10 min

    1


    电泳检测

    2%琼脂糖凝胶;电压130 V;电泳时间30 min。


    实验结果

    1569488999548423.png
     M:100 bp DNA ladder
    Lane1-2:10重PCR产物


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    10138ES03/08/25/76

    1ml/5ml/25ml/500ml

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