玻连蛋白(Vitronectin),又称S-蛋白或血清扩散因子,是一种在肝脏中合成的分泌型糖蛋白,参与细胞粘附、迁移和存活。玻连蛋白主要以单体形式循环,但可以经历构象变化,形成二硫键连接的多聚体。多聚体玻璃粘连蛋白可以有效地与细胞外基质结合,在基质内,玻连蛋白可以通过与细胞表面受体如整联素αVβ3和αVβ5结合来支持细胞粘附。玻连蛋白可促进内皮细胞贴附,伸展和增殖,促进多种正常细胞及癌细胞的分化,可用于细胞迁移实验的研究。玻连蛋白与纤连蛋白、层连蛋白统称为细胞粘附蛋白。 干细胞培养应用:干细胞是一种常见的粘附生长型细胞,在体外培养时,需要先附着到培养器皿表面扩展成它原来的形态,才能够进入正常的生命代谢过程。细胞首先分泌细胞外基质蛋白黏附在培养器皿的底面,细胞通过其表面的蛋白与细胞外基质蛋白结合,完成粘附过程。玻连蛋白(vitronectin)能促进干细胞的自我更新,而不影响干细胞的分化的潜能,因此可作为干细胞培养的细胞外基质底物。 本产品是一种459个氨基酸的单链蛋白,来源于HEK293细胞。Vitronectin蛋白在iPSC和hESC细胞的培养中,作为一种细胞培养基质,可以显著提高iPCS细胞的生长和增殖速率,并促进其向特定细胞系的分化。 本品以冻干粉形式供货,为细胞培养级别,具有批次间差异小、无潜在病毒感染风险等特点。
高纯度、高活性、低内毒素、高批间一致性
Human VTN蛋白包被方法
本方案仅作参考,具体包被条件需要根据细胞培养体系进行优化。
1.取出重组人玻连蛋白,用无菌1×PBS,复溶至浓度0.1- 1 mg/mL。混匀后,用培养基稀释至5- 20μg/mL工作液浓度。
2.根据实验所用培养器皿,参考下表1. 建议的包被量进行包被。包被时,使包被液均匀覆盖在培养皿表面,37℃孵育1小时以上。37℃过夜包被,效果更佳。
3.使用时,吸去培养容器表面的Human VTN工作液,将细胞直接接种到培养器皿中。
注意:
1)VTN的工作浓度与不同细胞系密切相关,请根据不同细胞系对VTN包被浓度进行适当调整。
2)避免使用在4℃保存24小时以上的、配制好的VTN包被液进行包被。
表1. Human VTN 包被不同培养器皿的建议使用体积
培养皿 |
包被体积 |
6孔板 |
1 mL/孔 |
12孔板 |
0.4 mL/孔 |
24孔板 |
0.2 mL/孔 |
35mm 培养皿 |
1 mL |
100mm 培养皿 |
6 mL |
T-25 cm2培养瓶 |
2.5 mL |
T-75 cm2培养瓶 |
7.5 mL |
T-175 cm2培养瓶 |
17.5 mL |
-25 ~ -15℃保存,收到货之后有效期1年。 复溶后,无菌条件下,-85 ~ -65℃保存,3个月有效期。