推荐应用
本品来源于EHS小鼠肉瘤(Engelbreth-Holm-Swarm mouse tumor),含有微量巢蛋白。可用作组织培养表面的薄层包被或培养基内的可溶添加剂。作为基底膜的主要成分,层粘连蛋白具有大量的生物活性,包括促进细胞粘附、迁移、趋化、生长和分化,以及神经轴突生长。 本品以无菌溶液形式提供,直接稀释到工作浓度使用即可。用于生长表面包被的常用浓度范围是 1-10μg/cm2。
使用方法
一、产品溶解
1.于实验前,将本品从-80℃取出,置于 4℃或冰上使其缓慢融化。融化过程中可能有絮凝物产生。本品通常需要 4℃存放 1-48h 才会完全融化。
2.如果单次不能完全用完,务必根据单次用量分装到无菌的塑料离心管内,保存在-80℃,建议 1 个月内用完。不要保存在无霜冰箱,避免反复冻融。
二、产品应用
用于细胞培养包被基质的建议浓度为 1-10μg/cm2。
三、包被步骤
以下步骤作为参考,依据具体培养体系来确定最佳的包被浓度。
1.用无菌的无血清培养基稀释层粘连蛋白储存液到所需的工作浓度,以最小体积完全覆盖培养表面,推荐包被浓度为 1-10μg/cm2。比如,若最终包被浓度为 5μg/cm2,稀释储存液到 50μg/mL,按照 1mL/35mm培养皿,3ml/60mm 培养皿等加量。
2.加适量稀释好的层粘连蛋白到培养器皿表面。
3.室温孵育1h。
4.吸掉多余层粘连蛋白溶液。
5.用去离子水清洗,注意操作过程中不要刮破底层。
6.此时的培养板(皿)即可使用。或者以微湿或无菌风干后置于 2-8℃保存待用,保持无菌。
高纯度、高活性、低内毒素、高稳定性
-85~-65℃保存,收到货之后,有效期6个月。避免反复冻融,保持冷冻。
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