推荐应用
RNase抑制剂 (RNase inhibitor) 是存在于人的胎盘中一种特异性核糖核酸酶 (RNase) 抑制剂,其特异性失活RNase的原理是:与RNase以非共价键结合形成复合体,造成RNase失活。本产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组哺乳动物RNase抑制剂,能够广泛抑制各种类型RNase (RNase A, B等)。经RT-PCR、RT-qPCR检验,本产品能与各种逆转录酶、DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比,本产品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性。
1)UCF.ME®超低残留:大肠杆菌DNA残留水平<0.02 copies/100 U;
2)核酸酶残留低:无核酸外切酶、切口酶、RNase残留;
3)广谱RNase抑制活性:可抑制真核RNase(如RNase A和RNase B)活性;
4)兼容性广:兼容Taq/Tfl DNA 聚合酶、AMV/M-MLV 逆转录酶、ImProm-II™逆转录酶等,适配RT-PCR、RT-qPCR反应;
5)耐热性强:在25℃~55℃都具有活性,55℃处理30min仍保留70%以上活性;
6)全流程保护:即使温度超过14678蛋白的变性温度,也不会造成可能存在的RNase 活性的恢复,可在加热前、加热中及加热后保护 RNA。
1)E.coli基因组DNA残留< 0.02 copies/100 U,显著低于常规版本
对不同批次的UCF.ME® Plus RNase Inhibitor (Cat#14678ES)基因组DNA残留检测,并与常规Murine RNase inhibitor的宿主残留水平对比,结果显示UCF.ME® Plus RNase Inhibitor (Cat#14678ES)宿主基因组DNA残留显著低于显著低于常规Murine RNase inhibitor。

图1 UCF.ME® Plus RNase Inhibitor与常规版Murine RNase inhibitor中E.coli基因组残留检测结果对比
2)RNA酶残留水平媲美进口品牌
使用IDT的RNaseAlert® Substrate Nuclease Detection System,分别对翌圣及Promega的RNase抑制剂进行RNase残留水平检测。结果显示:翌圣三款低残留RNase抑制剂(Cat#14678、14675、14672)的残留水平与空白对照相当;进口品牌的RNase抑制剂残留水平略高于空白对照,但低于阳性对照。

图2 UCF.ME® Plus RNase Inhibitor (Cat#14678ES) RNase残留检测
3)热稳定性:55℃处理30min,仍保留70%以上活性
在相同条件下对14678和Promega的RNase抑制剂进行加热处理,比较热处理后的酶活残留率。结果表明:14678的热稳定性与进口品牌相当,55℃处理30min,仍可保留70%以上活性。

图3 UCF.ME® Plus RNase Inhibitor (Cat#14678ES)热稳定性验证
-25~-15℃保存,有效期2年。
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