Nature Biotechnology|华东理工大学杨弋:实现了动物细胞内RNA活动精密控制

转染试剂在生命科学领域的诸多研究方向被广泛使用，应用场景囊括了基因表达、基因沉默、CRISPR基因编辑等涉及细胞操作的各个环节。翌圣系列转染试剂凭借转染效率高，可重复性好等优势，在诸多分子细胞实验中成功应用，受到广大科研工作者的信赖，相关科研成果也陆续发表。

值得一提的是，Hieff Trans™ Liposomal Transfection Reagent脂质体核酸转染试剂转染质粒已经获得广大用户的认可，并发表了诸多高分影响因子文章。

RNA结构与功能研究

2022年1月3日，华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室、光遗传学与合成生物学交叉学科研究中心杨弋教授团队在《Nature Biotechnology》杂志上在线发表了题为《Optogenetic control of RNA function and metabolism using engineered light-switchable RNA-binding proteins》的研究长文。

该研究基于合成生物学及光遗传学原理，并结合全新的高通量筛选策略成功构建了系列光控RNA效应因子，实现了动物细胞内RNA生成、剪接、运输、翻译、降解等代谢活动的时空精密控制。（《Nature Biotechnology》（IF54.908））

miRNA技术相关的疾病机制与潜在新的治疗策略

复旦大学于文强课题组通过抑癌基因再激活为治疗三阴性乳腺癌提供了全新的视角。

在此次研究中，于文强带领的研究团队以乳腺癌为疾病研究对象，研究了157对乳腺癌、29个卵巢癌以及一些正常组织样本，结合 NamiRNA - 增强子 - 基因激活通路的研究和乳腺癌中增强子的异常表现，他们推测乳腺癌中可能存在大量低表达的 NamiRNA，这些低表达的 NamiRNA 无法借助 NamiRNA - 增强子这一通路激活抑癌基因，进而抑癌基因呈现低表达，也就为肿瘤的生长和发展提供了有利条件。（ 《Nucleic Acids Research》（IF16.9））

CRISPR-Cas基因编辑研究

武汉大学生命科学学院病毒学国家重点和省细胞稳态重点实验室殷雷课题组在Cas12a脱靶研究取得的新成果，在《Molecular Therapy》期刊上在线发表了题为“Cas12a variants designed for lower genome-wide off-target effect through stringent PAM recognition”的研究文章。

殷雷研究组长期关注病原识别和分子设计，研究组成功设计得到其PAM识别严格同时基因编辑效率依旧高效的多个变体，能同时编辑多个基因，在哺乳细胞全基因组上GUIDE-seq表明这些变体相较于野生型具有相当的基因编辑活性和更低的脱靶效应与染色体重排效应，并申请了相关专利。该研究为基因编辑酶的低脱靶人工设计改造提供了新的思路和候选分子。（《Molecular Therapy》（IF: 11.454））

靶点的机制研究

南京中医药大学杨烨、顾春艳课题组在治疗多发性骨髓瘤可能的潜在靶点AHSA1研究论文。多发性骨髓瘤（Multiple myeloma，MM）目前不可治愈，迫切需要新的治疗靶点和药物。

该研究在“以毒攻毒”治疗恶性肿瘤的中医药理论启发下，以具有抗肿瘤活性的传统毒性中药蟾酥提取物---蟾毒灵为探针，综合运用HuProt™20K蛋白芯片、蛋白质谱等方法，筛选并鉴定了与MM增殖耐药相关的致癌基因AHSA1。

机制研究揭示AHSA1作为HSP90A的协同伴侣激活CDK6和PSMD2, 从而促进MM细胞增殖、耐药。和作者李念光教授团队在国内首次合成了AHSA1选择性抑制剂KU-177，KU-177在原代细胞、PDX模式动物以及与蛋白酶体抑制剂药物联合用药中显示出良好抗肿瘤活性。同时，由于KU-177特异性靶向AHSA1，避免了蟾毒灵直接应用引起的毒副作用，最终达到了“减毒增效”的目的。

该研究立足于传统中医药理论与资源，运用现代大数据、组学及其他生命科学前沿技术，发现治疗MM的新靶标以及先导化合物，有助于填补我国在MM创新药物开发方面的空白。（《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》（IF11.161））

致病机制研究

浙江大学黄俊课题组与中科院生物物理所周政课题组在对乳腺癌易感基因产物BRCA1-BARD1异源二聚体被招募到DNA双链断裂损伤（DNA double-strand breaks，DSBs）处的分子与结构基础的研究论文。通过结构生物学、生物化学和细胞生物学等手段阐明了BRCA1-BARD1异源二聚体通过BARD1结合核小体并识别组蛋白标记而被招募到DSB位点，进而促进同源重组修复。

本研究发现BARD1通过识别泛素K63-E64位点，而非普遍存在的I44与I36位点与泛素结合，从而揭示了一种新的泛素识别模式。BARD1同时识别了核小体上DNA损伤诱导的H2AK15ub标记和新生核小体上未被甲基化修饰的H4K20me0标记。BARD1-泛素化核小体的结合是BRCA1-BARD1复合物在S/G2期被招募到DSB位点的基础。破坏BARD1-泛素化核小体的相互作用，严重影响了BRCA1-BARD1复合物在DSB位点的招募，致使同源重组修复效率下降，从而导致细胞对同源重组修复缺陷的肿瘤靶向治疗药物-聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶抑制剂（PARPi）非常敏感。本研究解析了BRCA1-BARD1复合物被招募到DNA损伤位点的分子和结构基础，诠释了相关BARD1突变的致病机理，同时为相应的癌症治疗提供了新的思路。（Molecular Cell（IF17.97））。

翌圣生物的Hieff Trans™ siRNA/miRNA体外转染试剂同样受到广大用户的青睐，如苏州大学周芳芳课题组和浙江大学张龙课题组对COVID-19治疗研究方向，在细胞表面受体血管紧张素转换酶2 (ACE2)的研究论文，构建了一种含有ACE2的细胞外囊泡(Vs)，并通过蛋白质棕榈酰化测定了EV-ACE2水平。研究表明，ACE2上的Cys141和Cys498残基会被锌指DHHC型棕榈酰转移酶 3(ZDHHC3)棕榈酰化以及被酰基蛋白硫酯酶1 (LYPLA1)去棕榈酰化，这些过程对于ACE2的膜靶向和EV分泌而言至关重要。

此外，实验通过将依赖于S-棕榈酰化的质膜(PM)靶向序列与ACE2融合，构建了表面富含ACE2的EVs(PM-ACE2-EVs)。结果表明，PM-ACE2-EVs能与SARS-CoV-2 S-RBD进行高亲和力结合，并阻断其与细胞表面ACE2的相互作用。该研究为构建用于预防和治疗COVID-19的新型生物材料提供了一个有效的工程化方案（《Advanced Materials》（IF30.849））

相关发表文章不胜枚举……

为回馈广大用户对翌圣系列转染试剂的支持与信赖，近期将有该产品线的促销活动，敬请关注！

翌圣生物转染试剂产品如下表所示：

应用场景	名称	货号	规格
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：DNA、siRNA	Hieff Trans® 脂质体核酸转染试剂	40802ES02	0.5 mL
		40802ES03	1.0 mL
		40802ES08	5×1 mL
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：DNA	磷酸钙法细胞转染试剂	40803ES70	200 T
用途：病毒感染、DNA转染	聚凝胺（10 mg/ml）	40804ES76	500 μL
用途：病毒感染、DNA转染	聚凝胺（10 mg/ml）	40804ES86	5×500 μL
细胞类型：悬浮核酸类型：DNA、siRNA	Hieff Trans® 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂	40805ES02	0.5 mL
		40805ES03	1.0 mL
		40805ES08	5×1 mL
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：siRNA、miRNA	Hieff Trans® siRNA/miRNA体外转染试剂	40806ES01	0.1 mL
		40806ES02	0.5 mL
		40806ES03	1.0 mL
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：DNA、siRNA、miRNA	Hieff Trans® 通用型转染试剂	40808ES02	0.5 mL
		40808ES03	1 mL
		40808ES08	5×1 mL
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：mRNA	Hieff Trans® mRNA转染试剂	40809ES01	0.1 mL
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：mRNA	Hieff Trans® mRNA转染试剂	40809ES03	1 mL
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：DNA	PEI转染试剂MW25000	40815ES03	1 g
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：DNA	PEI转染试剂MW25000	40815ES08	5×1 g
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：DNA	线性PEI转染试剂（速溶型）MW40000	40816ES02	100 mg
细胞类型：贴壁/悬浮核酸类型：DNA	线性PEI转染试剂（速溶型）MW40000	40816ES03	1 g
细胞类型：293 核酸类型：DNA 用途：AAV/LV载体研发与工艺开发	Hieff Trans® PEI转染试剂	40820ES04	1.5 mL
		40820ES10	10 mL
		40820ES60	100 mL
细胞类型：293 核酸类型：DNA 用途：AAV/LV载体大规模生产	Hieff Trans® PEI Transfection Reagent-GMP	40821ES10	10 mL
		40821ES60	100 mL
		40821ES80	1 L

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