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GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 5 mL GST标签蛋白纯化预装柱,5 mL
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产品介绍

GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF是一种GST标签蛋白纯化树脂,可以一步纯化各种表达系统中谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽依赖性蛋白和谷胱甘肽重组衍生物。在结构上,该树脂是以高度交联的4%琼脂糖凝胶为基质,通过12个原子的间隔臂,用化学方法共价结合还原型谷胱甘肽制作而成,具有更高的物理化学特性,可以耐受更高的压力,在相对较高的流速下,实现对目的蛋白的纯化,更适于工业大规模蛋白的纯化。

GSTSep Glutathione 4FF Chromatography Column, 5 mL是装填了GSTSep Glutathione Agarose Resin 4FF的一种中压预装柱,规格5 mL,预装柱具有标准接口,可以适配商品化的各类中压色谱系统,如ÄKTA 等,方便客户操作。

翌圣为您提供蛋白纯化实验整体解决方案,相关产品选购请参考:蛋白纯化系列产品-选购指南

产品特色
基质(Matrix)高度交联的4%琼脂糖微球
配体(Ligand)通过12原子间隔臂偶联的谷胱甘肽
粒径(Bead size)45-165 µm
载量(Capacity)>10 mg GST蛋白(40 kDa)/mL基质
最大压力(PressureMax)0.3 MPa,3 bar
pH稳定范围(pH range)3-12
储存缓冲液(Buffer)含20%乙醇的1×PBS


存储条件

2~8℃保存,有效期2年。

FAQ

Q:为什么洗脱组分中无目的蛋白?

A:可能是目的蛋白聚集产生沉淀,建议在细胞裂解前溶液中加入 DTT,终浓度为 1-10 mM。

Q:为什么柱子反压过高?

A:可能是填料被堵塞,建议清洗树脂。

Q:为什么电泳或 Western Blot 检测中发现多条带?

A:可能是Mr 70000 蛋白与目的蛋白一起纯化下来。Mr 70000 蛋白可能是大肠杆菌基因DnaK 的产物,建议可以在目的蛋白中加入 50 mM Tris-HCl,2 mM ATP,10 mM MgSO4,pH 7.4 在 37℃加热 10min 去除。

Q:为什么目的蛋白没有完全洗脱下来?

A:可能是非特异性疏水作用影响目的蛋白的溶解和洗脱,建议在洗脱液中加入非离子型洗涤剂,如 0.1%的 Triton X-100 或者 2%正辛基-β-D-吡喃葡糖苷 Tween-20。

Q:洗脱液怎么配?

A:按说明书用平衡缓冲液配制还原性谷胱甘肽(Cat#60342ES)即可,配完后需要检测PH是否跟平衡缓冲液一致,一般谷胱甘肽溶解后pH会偏酸,需重新调整到pH 7.4或pH 8.0(建议调整到pH 8.0,适当提高pH能提高洗脱效率)。

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