20512ES孵育法纯化的步骤?
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2026-08-24
1)根据纯化的样品量,取适量填料加入离心管中,1000 rpm离心1min,吸弃上清;
向离心管中加入5倍介质体积的平衡液清洗介质,1000 rpm离心1min,吸弃上清; 重复两次以上。
加入样品,封闭离心管,4℃振荡孵育2-4 h或者37℃孵育30 min-2 h。
孵育结束后,1000 rpm离心1min,吸弃上清,上清保留作为流穿,用于电泳鉴定。
用5倍介质体积的洗杂液清洗介质,1000rpm离心1min,去除上清 (注意不要吸到介质) ,重复3-5次,中间建议换新离心管。
直接在凝胶中加loading buffer,煮沸,11000rpm离心1min离心,取上清跑胶。
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