接头中 index/Barcode 的组合原则主要包括以下两点：（1）碱基平衡：确保接头序列中 A、T、C、G 四种碱基的含量相对均衡，以避免因碱基组成差异导致的扩增偏差或测序信号异常；（2）荧光平衡：对于带有荧光标记的 index/Barcode，需保证不同 index/Barcode 组合的荧光信号强度相近，以减少测序过程中因荧光差异引起的定量误差。（详情可查看翌圣生物公众号微信软文“一文全面解析NGS 接头的奥秘”）