使用 40612ES 试剂盒检测胰酶‑EDTA 样品时,加入样品后 PCR 管内液体立刻变为天蓝色,是什么原因?
使用 40612ES 试剂盒检测胰酶‑EDTA 样品时,加入样品后 PCR 管内液体立刻变为天蓝色,是什么原因?
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2026-08-24
属于样品干扰导致的提前变色,并非扩增反应引起。 1. 试剂盒反应原理:体系中 HNB 指示剂与游离 Mg²⁺结合呈现蓝紫色;PCR 扩增生成焦磷酸,焦磷酸消耗 Mg²⁺,HNB 游离,溶液转为天蓝色。 2. 提前变色诱因:胰酶‑EDTA 样品中的**EDTA 具备强螯合能力,可快速螯合消耗体系内 Mg²⁺**;同时试剂盒配方含磷酸二氢钠,磷酸根离子也可结合镁离子。二者共同作用,快速降低游离 Mg²⁺浓度,HNB 提前游离释放,因此未启动 PCR 就直接显现天蓝色。
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