Hieff Canace^® High-Fidelity DNA Polymerase是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase，经基因工程改造而成。其蛋白结构包含5’→3’聚合酶结构域和经过改造的3’→5’外切酶结构域。这种组合大幅度提升了酶的耐热性，保真性。耐热温度达到98℃，保真性是Taq DNA聚合酶的52倍，普通Pfu DNA聚合酶的6倍。酶溶液中添加了独特的延伸因子，扩增速度达到15 sec/kb。本产品配备了优化后的酶缓冲液，添加了PCR增强组分，使得该酶具有极强的扩增效率和广泛的模板适应性，非常适合复杂模板的扩增。扩增产物为平末端。

冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。

Q：这个酶有哪些方向的应用？

A：点突变、基因克隆、复杂模板扩增、高通量建库等实验。

Q：这个酶的保真性如何？

A：Canace™ 高保真 DNA 聚合酶的保真性是 Taq 酶的 52 倍，Pfu 酶的 6 倍。（Lac I 法测定。）

Q：可以扩增多长的片段？

A：简单模板可扩增 20 kb，复杂模板可轻松扩增 10 kb

Q：灵敏度如何？最低可以扩增到多少浓度的模板？

A：Canace™ 高保真 DNA 聚合酶扩增 5 kb 的目的 DNA 片段。模板量低至 1 pg 仍然可以有效扩增。（模板：λDNA，退火温度：60℃，延伸时间：15 sec/kb。）

Q：扩增速度如何？可以缩短延伸时间吗？

A：Canace™ 高保真 DNA 聚合酶扩增 2.1 kb 和 4.2 kb 片段。延伸时间低至 15 sec（延伸速度分别达到7 sec/kb 和 3.7 sec/kb）仍然可以有效扩增。当延伸速度设置为 30 sec/kb 时，产量达到最高。（模板： 拟南芥基因组 DNA，退火温度：60℃）

Q：是否存在复杂模板难扩增的情况？

A：适用于基因组 DNA 和 cDNA 等复杂模板的扩增，Canace™  高保真 DNA 聚合酶扩增 2 kb，3 kb，4 kb， 5 kb 和 6 kb 左右长度的 25 个基因片段。Canace™高保真聚合酶与同类产品相比，显示出更强的扩增能力。（模板：拟南芥基因组 DNA，退火温度：60℃，延伸时间：30 sec/kb）。

Q：Canace®高保真酶扩增产物是什么？

A：扩增产物是平末端，可以直接用于平末端克隆；若需 TA 克隆，需纯化后加 A

Q：Canace®是否适用于高 GC 含量的模板扩增？

A：适用；可以在 PCR 体系中加入终浓度为 3 %的 DMSO，可能会有利于扩增。

Q：Canace®高保真酶中附带的 buffer 中含有 dNTPs 吗？

A：含有，此外 buffer 中还含有 Mg2+等。

Q：Canace®高保真酶是否可以直接用于粗品的扩增，如酵母菌菌落扩增？

A：这个目前还没有验证，但 Canace®高保真酶是耐高温的，98℃预变性，延长预变性和延伸时间应该可以扩出。此外，还可以煮沸酵母菌液 10min，更有利于扩增。