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Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 细胞核/细胞浆蛋白抽提试剂盒
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产品介绍

细胞核蛋白、细胞浆蛋白在细胞研究和蛋白质组学中具有重要意义,因此在体外研究中需要将其从细胞或组织中分离。本试剂盒提供了一种较为简单方便,高效的蛋白抽提方法,其原理是:通过细胞浆蛋白抽提试剂A和B,在低渗透压条件下,使细胞充分膨胀,然后破坏细胞膜,释放出细胞浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的细胞核蛋白抽提试剂C抽提得到细胞核蛋白。

本试剂盒1次可对2×106个细胞和30-50 mg组织样品进行抽提,按照该使用量,20126ES50可抽提50个样品,20126ES60可抽提100个样品。

翌圣为您提供Western Blot实验整体解决方案,相关产品选购请参考:WB实验系列产品-选购指南

产品组分信息

组分编号组分名称20126ES50(50T)20126ES60(100T)
20126-ACytoplasmic Extraction Reagent A 胞浆蛋白抽提试剂A15 mL30 mL
20126-BCytoplasmic Extraction Reagent B胞浆蛋白抽提试剂B0.5 mL1 mL
20126-CNuclear Extraction Reagent 胞核蛋白抽提试剂2.5 mL5 mL


产品特色

1.即用型试剂,操作简单快捷。

2.能够分离不同细胞定位的蛋白。

存储条件

冰袋运输。-15~-25℃保存,1年有效。

FAQ

Q:组织提取浆蛋白,组织量与提取试剂的比例如何?

A:将组织切成非常细小的碎片。根据后续使用量按照20:1的比例混合试剂A和B,并加入PMSF至最终浓度为1 mM,混匀即可配制成组织匀浆液。按照每60 mg组织加入200 µL组织匀浆液的比例混合组织和组织匀浆液(对于不超过60mg的组织样品,仅需加入100微升组织匀浆液),并在玻璃匀浆器内充分匀浆。

接下来请参照【细胞样品蛋白抽提】的步骤2)开始操作,即把沉淀当做已经离心收集好的细胞沉淀操作。(特别说明:对于起始量为60mg的组织样品,后续直接按照步骤2-7操作即可;对于起始量不超过60mg的组织样品,后续步骤中的溶液的用量须减半使用)。

对于组织样品,如果每个样品的重量不超过60mg,本试剂盒可以抽提50个样品,如果每个样品为60mg,本试剂盒可以抽提25个样品。

Q:该产品是否可以用于冻存组织?

A:对于组织样品,仅适合于新鲜组织,对冻存过的组织抽提效果很差。

Q:使用cocktail代替PMSF可以吗?

A:可以。

Q:这个试剂盒可以用来提取真菌或植物的细胞核膜蛋白吗?

A:本产品不适用于真菌及植物样品的。

Q:细胞沉淀收集后,如果不立马提蛋白,是需要放在-20还是-80保存吗?

A:建议提取蛋白后再保存。样本需要新鲜细胞的,不适合冻存的。

Q:该产品按说明书中所述,核在裂解之前,即使吸干净胞浆液体,会不会胞浆残留在核里面?

A:可以用预冷pbs洗一下,减少浆蛋白污染。

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