高活性Wnt3a，经多种类器官培养验证

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2023-10-11

类器官是在体外建立的与体内组织或器官高度相似的一种三维模型，在疾病建模、器官再生和个性化治疗领域发挥重要作用。类器官的培养需要多种细胞因子的维持，其中Wnt3a是最常用的因子之一，在大多数组织来源的类器官培养中起关键作用。

PART1

什么是Wnt-3a？

Wnt家族是一个巨大的分泌蛋白家族，该家族包含19种人类蛋白质，包括Wnt1、Wnt2、Wnt2b（Wnt13）、Wnt3、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt5b、Wnt6、Wnt7a、Wnt7b、Wnt8a、Wnt8b、Wnt9a（Wnt14）、Wnt9b（Wnt14b）、Wnt10a、Wnt10b、Wnt11 和 Wnt16。该家族高度保守，富含半胱氨酸。Wnts 通过与细胞膜受体结合和/或通过与相邻细胞膜受体结合介导Wnt信号通路。Wnt信号通路可分为经典通路和非经典通路。一种参与β-catenin介导的经典信号通路，包括Wnt1，Wnt2，Wnt2b、Wnt3、Wnt3a、Wnt7a、Wnt8、Wnt8b和Wnt10a；另一种即不依赖β-catenin的非经典信号通路，包括Wnt4，Wnt5a，Wnt6和Wnt11。Wnt3a作为Wnt家族最具有代表性的信号蛋白，其分布广泛，在调节多效性细胞功能（包括自我更新、增殖、分化和运动）中起关键作用。

PART2

Wnt-3a信号通路传导机制

Wnt信号通路是一个复杂的蛋白质作用网络，其功能最常见于胚胎发育和癌症，但也参与成年动物的正常生理过程。Wnt3a与其受体卷曲 (Fz) 蛋白和脂蛋白受体相关蛋白 (LRP5/6) 共受体结合，然后激活支架蛋白 Disheveled (Dvl) ，并引起“破坏复合物”的解离（破坏复合物由酪蛋白激酶 1 (CK1)、糖原合酶激酶-3β (GSK-3β) 和支架蛋白腺瘤性结肠息肉 (APC)、Axin1 和 Axin2 形成的）。 “破坏复合物”的解离稳定细胞质中游离状态的β-Catenin蛋白，细胞质中积累的β-Catenin蛋白进入细胞核与TCF/LEF家族的转录因子结合，从而启动下游靶基因（如c-myc、Cyclin D1等）的转录，诱导后续的细胞反应的发生。我们可以把Wnt信号通路简单概括为：Wnt3a→FZD→DVL→复合体解散→β-Catenin入核→TCF/LEF→下游基因转录。没有Wnt3a，β-连环蛋白不会在细胞质中积累，因为“破坏复合物”通常会降解它，通过将β-连环蛋白靶向泛素化而降解β-连环蛋白，随后将其送至蛋白酶体进行消化，无法入核启动下游基因转录。Wnt/β-catenin信号通路是生物体进化中最保守的通路之一，在胚胎发育、细胞生长、分化、极性形成、神经发育和癌变中起关键作用。

图1. Wnt3a的经典信号通路（源自参考文献）

PART3

Wnt3a 与类器官

Wnt3a是类器官构建最常用的培养因子之一，其高活性、批次间稳定、无污染和无血清制备是类器官实验成功的关键。Wnt3a目前已用于肠、胃类、胰腺、肝脏、甲状腺、食道及神经系统等类器官培养。为助力科研和药企人员针对Wnt3a在类器官形成，以及在肿瘤中的临床应用研究，YEASEN推出Wnt3a高活性蛋白（Cat: 92276ES）产品，助力类器官培养。

PART4

产品数据展示

高纯度

SDS-PAGE

Figure 2. Human wnt3a Protein on SDS PAGE under reduced condition. The purity is greater

高活性

Cell Based Assay

Figure 3. Measured by its ability to induce Topflash reporter activity in HEK293T human embryonic kidney cells. The ED50 for this effect is 25 ng/mL.

肠道类器官验证

Organoid Culture

Figure 4. Human intestinal organoids were cultured with Wnt3a . The organoids showed good morphology.

PART5

多种类器官培养验证

PART6

相关产品信息

产品名称	货号	规格
Human Wnt-3a	92294ES10	10μg
Human R-Spondon-1	92278ES20	20μg
Human EGF	92701ES10	10μg
Human Noggin	92623ES10	10μg
Human FGF-2	91330ES10	10μg
Human FGF-10	91306ES10	10μg
Human VEGF165	91520ES10	10μg
Human Laminin 521	92602ES60	100μg
Human HGF	92055ES10	10μg
Human BMP-4	92053ES10	10μg
Human BDNF	92129ES08	5μg
Human FGF-7	91304ES10	10μg
Human BMP-2	92060ES10	10μg

PART7

参考文献

1.Zheng W J, Yao M,2, Fang M, et al . Oncogenic Wnt3a: A Candidate Specific Marker and Novel Molecular Target for Hepatocellular Carcinoma[J].Journal of cancer,2019.