为什么出现双峰，并且较低峰 Tm 在 80℃之前？
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2026-08-24
较低峰 Tm 在 80℃之前可能原因：存在引物二聚体（一般mRNA 反转录后定量，产物在 100-150bp 左右，峰对应 Tm 值为 80-90℃。若有引物二聚体存在，引物二聚体大小只有几十bp，峰对应 Tm 值在 70-80℃之间。故会在 80℃以前出现一个峰， 80℃以后出现一个峰），模板浓度过低或引物浓度过高。
解决方案：
适当提高退火温度； b）提高模板量，降低引物浓度； c）重新设计引物。
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