一、背景介绍

转录组（transcriptome）广义上指某一生理条件下，细胞内所有转录产物的集合，包括信使RNA、核糖体RNA、转运RNA及非编码RNA；狭义上指所有mRNA的集合。通过对某一物种的mRNA进行高通量测序，能够在单核苷酸水平对特定物种的整体转录活动进行检测，从而全面快速地获得该物种在某一状态下的几乎所有转录本信息。由于转录组测序可以得到全部RNA转录本的丰度信息，加之准确度又高，使其具有广泛的应用。

转录组测序根据待测样品的物种分为真核转录组和原核转录组。真核生物与原核生物mRNA的结构不同，所以前期富集的方法也有所不一致。

图1. 真核生物与原核生物mRNA 的区别

真核生物mRNA中含有poly-A尾结构，因此可以使用oligo-T修饰的磁珠进行特异性的富集mRNA；而原核生物并不像真核生物mRNA具有poly-A的结构，因此，无法直接利用oligo-T磁珠将mRNA纯化出来，因而原核生物一般来说，可以通过反向富集的方法，即去除Total RNA中rRNA进行目标RNA的富集。之后再通过片段化，逆转录一链合成，二链合成以及末修加A，接头连接，文库扩增等步骤，形成可上机测序的文库。

图2. 翌圣提供不同mRNA富集方法建库解决方案

二、产品推荐

Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit是一款高效RNA文库构建试剂盒，通过流程优化，将二链二成，末修加A等步骤合并为一步完成，大大降低实验操作时间，同时用户可自行选择RNA富集模块进行文库构建。

三、性能展示

（一）rRNA去除反向富集

样本信息：不同DV200 Human FFPE RNA

试剂盒：翌圣：Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit（Cat#12252）

竞品：N*品牌其他试剂：

rRNA去除：Hieff NGS® MaxUp Human rRNA Depletion Kit （rRNA & ITS/ETS）（Cat#12257）

RNA纯化：Hieff NGS® RNA Cleaner(Cat#12602)

DNA纯化：Hieff NGS® DNA Selection Beads(Cat#12601)

文库定量：dsDNA HS Assay Kit for Qubit®(Cat#12640)

建库接头：Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer for Illumina® (Cat#12414)

1.下机数据展示

*DV200 表示样本中大于200nt的RNA 片段所占的比例，对于降解严重的FFPE 样本，DV200值能够更好的反应样本的质量。

2.一致性对比分析

（二）Oligo-dT磁珠富集

样本信息：模式作物拟南芥 RNA试剂盒：

翌圣：Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit（Cat#12252）

竞品：N*品牌、V*品牌

其他试剂：

mRNA纯化：Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit（Cat#12603）

DNA纯化：Hieff NGS® DNA Selection Beads(Cat#12601)

文库定量：dsDNA HS Assay Kit for Qubit®(Cat#12640)

建库接头：Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer for Illumina® (Cat#12414)

1.文库下机数据展示

2.一致性对比分析

四、订购信息

HB210129