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为什么熔解曲线出现双峰,双峰 Tm 都在 80℃以前?

为什么熔解曲线出现双峰,双峰 Tm 都在 80℃以前?

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2026-08-24

双峰Tm 都在 80℃以前的可能原因:做 MicroRNA 定量时存在引物二聚体。Micro RNA 反转录后定量, 产物在 80-90bp 左右,峰对应Tm 值为 70-80℃,若有引物二聚体存在,引物二聚体大小只有几十 bp,峰对应 Tm 值也在 70-80℃之间。故会在 80℃ 以前出现双峰。
优化方法:提高退火温度、降低引物浓度或重新设计引物等方式优化。

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