11139ES克隆逆转和定量逆转有什么区别?克隆逆转产物和定量逆转产物可以相互吗?
11139ES克隆逆转和定量逆转有什么区别?克隆逆转产物和定量逆转产物可以相互吗?
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2026-08-24
a)目的不同:克隆逆转后的 cDNA 后续用于基因克隆,后续实验以普通 PCR 为主; 定量逆转后的 cDNA 后续用于基因定量,后续实验以qPCR 为主。
逆转录过程不同:克隆逆转使用 Oligo dT,保证合成的长度。随机引物使用较少; 定量逆转使用 Oligo dT 或随机引物,或两者混合使用。
克隆逆转产物可用于 qPCR,但定量逆转产物不推荐用于普通 PCR,定量逆转试剂中含 Oligo (dT)与 Random Primers 混合引物,产物长度较短,可做短片段 PCR,过长的不适合。
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