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高保真酶扩增后是平末端产物，如何加 A 尾？
高保真酶扩增后是平末端产物，如何加 A 尾？
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2026-08-24
若使用Canace扩增后获得平末端产物，需加A尾时，可按以下步骤操作：（1）首先对平末端PCR产物进行纯化，要求产物浓度至少为20ng/μL（可通过琼脂糖凝胶电泳观察条带清晰度及亮度判断，或通过Nanodrop和Qubit定量）。（2）取14.5μL PCR产物，加入2μL Taq Buffer、3μL dNTP及0.5μL Taq 酶，在 72℃条件下反应10~20分钟。（3）反应结束后，直接对加A 尾的DNA片段进行回收纯化，即可用于后续连接等操作。
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