2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液是即用型2×预混合溶液，包含Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系。预混液中添加了Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase的热启动因子，极大提高了扩增的检出率和产物的特异性。预混液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力，扩增目的片段的长度可长达10 kb，该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性，其保真性是Taq DNA聚合酶的52倍，是普通Pfu DNA聚合酶的6倍。扩增速度可达15 sec/kb。适用于复杂模板的扩增，扩增产物为平末端。

2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，反应体系只需加入引物和模板即可，并可以通过两步法的程序进行扩增，简化了实验步骤，节省了时间。本产品中不含染料，PCR产物需加入Loading buffer后进行电泳。另外，该产品还含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。

• 保真性高：Taq酶的52倍，Pfu酶的6倍。
• 特异性好：目的条带单一。
• 延伸速度快：可达15 sec/kb，极限速度1 sec/kb。
• 灵敏度高：可扩增低至1 pg模板。
• 适用性广：适合不同长度，不同GC含量模板的扩增。

• 高特异性：目的条带单一

图. 5种品牌的高保真DNA聚合酶扩增2 kb，4 kb的小鼠gDNA。Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶与同类产品对比，显示出更高的特异性和产量。Y：Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶；A-E：其他品牌的高保真DNA聚合酶；M：1kb DNA Marker。

• 延伸速度快：可达15 sec/kb，极限速度达1 sec/kb

图. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶分别扩增小鼠gDNA 2 kb和水稻gDNA 3 kb片段。不同延伸速度（1-60 sec/kb）都可有效扩增。M：1kb DNA Marker。

• 灵敏度高：可扩增低至1 pg模板

图. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶扩增质粒3 kb片段，不同模板量（1 pg-0.5 μg）都可有效扩增。NC：阴性对照。M：1kb DNA Marker。

• 适用于不同GC含量片段的扩增

图. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶对不同GC含量（30-70%）片段都可高效率的进行扩增。M：1kb DNA Marker。

• 适用于不同长度片段的扩增

图. Hieff Canace® Gold高保真DNA聚合酶对不同模板、不同长度（1-12 kb）片段都可高效率的进行扩增。M：1kb DNA Marker。模板：1-3：拟南芥gDNA，4-6：水稻gDNA，7-9：小鼠gDNA，10：人cDNA，11-18：人gDNA，19-21：质粒DNA，22：λDNA。

冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。

Q：Canace 错配率是多少?Canace Gold 是多少？

A：Taq 酶错配率:0.0002，大约 5kb 有一个碱基发生突变。Canace 约 0.000399%， 是 taq 酶的 52 倍。Canace Gold 与 Canace 保真性是一样的。

Q：Canace 具有保真性的原理？

A：具有 3’-5’的核酸外切酶活性，有校正功能。Q：Canace 高 保 真 酶 基 于 什 么 改 造 的 酶 ？ A：Pfu 改造的。

Q：Canace 高保真酶是否为热启动高保真酶？

A：暂时不是热启动，后续会有热启动高保真酶。

Q：Canace 扩增后是平末端产物，如何加 A 尾？

A:仅供参考：先对平末端PCR 产物纯化后，浓度要求至少 20ng/ ul（跑胶图像条带清晰，明亮即可），取 14.5 ul PCR 产物，加入 2 ul Taq Buffer，3ul dNTP，0.5 ul Taq酶，在 72℃反应 10~20min, 后直接回收纯化加A 尾的DNA 片段。

Q：Canace 可以用于酵母菌液吗？

A:不建议用。若要用则需通过煮沸，反复冻融，加蜗牛酶等等处理方法破壁后尝试。

Q：Canace 能用于多少长度的片段？

A：验证范围内长度理论上是可以的（验证范围：简单模板 20kb，复杂模板 10kb）。但具体能否扩出，还与模板和引物等有关。