Hieff Canace® Long PCR Master Mix (No Dye)是即用型2×预混溶液,包含High-Fidelity DNA Polymerase,dNTP以及针对长片段扩增而精心优化的缓冲体系,延伸速度为10 sec/kb。其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,是普通Pfu DNA 聚合酶的9倍,适用于复杂模板扩增,扩增产物为平末端。
Hieff Canace® Long PCR Master Mix (No Dye)具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点。可扩增GC含量在20%~80%的片段。可以扩增未经核酸提取的全血样本,适用于EDTA、柠檬酸盐或肝素保存的血液,以及干血斑卡片,更加快速灵活。此外,本品中还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。本产品中提供的所有试剂组分均经过严格质检,最高程度保障产品优异性能与批次间稳定性。
- 长片段扩增:最长可扩增40kb片段
- 快速延伸:5-10秒/kb延伸速度,省时高效
- 保真性好:83×Taq
- 适用性广:覆盖20-80%GC的片段,耐受好
- 灵敏度高:可检测低至1 pg的λDNA,100pg的基因组DNA
- 稳定可靠:可反复冻融30次
- 最长可扩增40kb片段
最长可扩增40kb片段。以50 ng人基因组DNA为模板,扩增1-40 kb片段,Hieff Canace® Long PCR Master Mix延伸速度10kb片段以下设置5 sec/kb,10kb片段以上设置10 sec/kb。M1:1 kb DNA Ladder;M2:50 kb DNA Ladder。结果显示,Hieff Canace® Long PCR Master Mix可以扩增长达40 kb的人基因组片段。
- 可保证cDNA长片段扩增
可满足长片段cDNA扩增。以翌圣快速反转录试剂盒(Cat#11149ES)反转录293 RNA得到的产物为模板,扩增不同长度的cDNA片段。M1:1 kb DNA Ladder;M2:DL15000 DNA Marker。结果显示,Hieff Canace® Long PCR Master Mix可满足1kb-14kb的cDNA扩增。
- 保真性好,可达83×Taq
保真性为83×Taq。采用二代测序方法测量保真度。结果显示,Hieff Canace® Long PCR Master Mix保真度是Taq DNA聚合酶的83倍。
- 耐受性好
可耐受一定程度的菌液。分别以不同量的菌液作为模板,结果显示,Hieff Canace® Long PCR Master Mix可耐受12.5%比例的菌液,且扩增特异性好。
可耐受一定量cDNA原液。以不同量11149ES的植物反转录产物和动物反转录产物为模板进行扩增(50 μL总体系)。M:DL10000 DNA Marker。结果显示,Hieff Canace® Long PCR Master Mix可满足15%的cDNA投入量。
- 灵敏度好
分别以1 pg-1 μg不同投入量的拟南芥基因组DNA、小鼠基因组DNA和质粒为模板,进行扩增电泳。结果显示,Hieff Canace® Long PCR Master Mix灵敏度好,多数情况下可保证少投入量模板扩增。
-25~-15℃保存,有效期1年。