在生物制品生产过程中，会伴随宿主细胞杂质残留。其中宿主残留DNA可能会引发潜在的安全问题（如潜在致瘤性、传染性，甚至增加免疫源性或导致突变），所以相关的法律法规相继出台以对生物制品中外源宿主DNA残留量进行严格把控。药监局规定，细胞表达产物的最终产品中残留DNA含量应尽可能低。《中华人民共和国药典》2020年版第三部规定，外源性DNA残留检测采用DNA探针杂交法、荧光染色法和定量PCR法。前2种传统方法存在序列特异性低、灵敏度低、重现性差、通量低、耗时长等缺点，不利于精确控制生物制品中DNA残留量。

翌圣生物基于荧光探针qPCR原理，研发了包括CHO、HEK293、E.coli、Vero、Human、MDCK、汉逊酵母、毕赤酵母等一系列快速专一的宿主细胞残留DNA检测试剂盒。最近，全新推出的HEK293宿主细胞残留DNA检测试剂盒(3G) (41331ES)和CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(3G) (41332ES)，可检测低至几十bp高丰度残留DNA片段，定量下限(LLOQ)亦可低至fg/μL。其中，CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(3G) 1h内即可完成qPCR反应，检测下限(LLOD)为0.05fg/μL。

产品优势

灵敏度高：基于荧光探针qPCR方法开发，LLOD低至0.05fg/µL；
准确性高：样本加标回收率在70%~130%范围内；
专属性强：与无关DNA无交叉反应，减少检测的假阳性；
符合法规：按照Chp、USP、ICHQ2(R1)等要求进行全面验证，性能符合中外法规标准；
配合审计：产品生产符合ISO13485质量体系标准，有完善的审计文件;
保障品质：试剂盒原材料全自主研发，qPCR Mix等酶产品在超洁净酶工厂生产。

产品数据

高灵敏度：LLOQ低至0.3fg/μL，LLOD低至0.05fg/µL

1.CHO宿主细胞残留DNA检测试剂盒（3G）线性范围为：3fg/μL~300pg/μL，R2=1，扩增效率为99.29%，各浓度检测值CV<15%。

图1. CHO DNA (3G)标曲线性图（左）和扩增曲线线性图谱（右）

2.检测标曲最低浓度点3fg/uL及以下浓度的CHO DNA (3G)，每个浓度10个重复。结果显示，在0.3fg/uL及以上浓度，CV<20%，即CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(3G)的定量限为0.3fg/uL。

图2. 0.3fg/μL CHO DNA qPCR检测结果

表1. CHO DNA (3G)定量限为0.3fg/μL

3.检测定量限0.3fg/μL及以下浓度的CHO DNA (3G)，每个浓度20个重复。结果显示，在0.05fg/μL及以上浓度20个重复孔的检出率≥19（即检出率≥95%），即CHO宿主细胞DNA残留检测试剂盒(3G)检测限可达0.05fg/μL。

图3. 0.05fg/μL CHO DNA (3G) qPCR检测结果

高特异性：与其他宿主细胞DNA无交叉反应

评估与CHO DNA (3G)亲缘性较高的小鼠物种基因组DNA以及生物制品生产中常用的细胞基因组DNA对CHO DNA检测试剂的干扰，干扰组与对照组扩增曲线重合，未见干扰（下图依次为Mouse、HEK293和E.coli基因组DNA对CHO DNA检测试剂的干扰数据）。

图4. CHO DNA (3G)试剂盒干扰实验结果

产品信息

产品	货号	品名	规格
残留DNA试剂盒	41308ES	E.coli Host Cell DNA Residue Detection Kit (2G)E.coli宿主细胞DNA残留检测试剂盒(2G)	50T/100T
	41331ES	HEK293 Host Cell DNA Residue Detection Kit (3G)HEK293宿主细胞DNA残留检测试剂盒(3G)	50T/100T
	41310ES	SV40LTA&E1A Residue DNA Detection KitSV40LTA&E1A残留DNA检测试剂盒	50T/100T
	41323ES	Plasmid DNA Residue Detection Kit质粒DNA残留检测试剂盒	50T/100T
	41325ES	Human Host Cell DNA Residue Detection Kit 人宿主细胞DNA残留检测试剂盒	50T/100T
	41330ES	Sf9 and Baculovirus DNA Residue Detection KitSf9和杆状病毒DNA残留检测试剂盒	50T/100T

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