无甘油可冻干！翌圣耐抑制热启动 Taq 酶，赋能分子POCT产业升级

2026-09-29

一、行业背景：常温储运需求催生分子冻干试剂

众所周知，传统分子诊断试剂存在运输和保存的难题。为确保试剂内有效成分（DNA酶、反转录酶等）的生物活性，一般需要在-20℃左右的冷链环境中储运。冷链运输需要大量的冰袋或干冰，成本较高，而且环境温度的变化容易造成检测试剂反复冻融，直接影响试剂的性能和保质期。

冻干试剂具有可常温运输和储存、随来随测、控制运输成本等多方面的优势，是开发分子POCT或其他新型分子诊断试剂的优选。

冻干原料的筛选不是单纯去掉不可冻干物质，原料选择环节需要针对每一个组分进行筛选或调试，切忌盲目寻找可冻干原料。

在PCR/qPCR反应体系中，DNA聚合酶是决定扩增性能、灵敏度与稳定性的核心原料。在冻干试剂体系中，聚合酶的活性保留率、热启动特异性和抗干扰能力，直接决定冻干试剂盒的货架期、灵敏度与应用性能，是无甘油冻干配方选型的关键。

二、客户痛点：甘油之困与抑制物之扰

在冻干试剂开发中，一个突出的技术难题来自甘油。传统分子酶或预混液常以高浓度甘油作为冷冻保护剂和稳定剂，但甘油会破坏水的结构、导致水分难以去除，从而抑制冻干升华过程，造成冻干饼物理结构塌陷、复溶性能下降、酶活损失，无法直接用于冻干配方。

与此同时，临床样本（咽拭子、血浆、痰液、粪便等）自带的各类抑制物，对Taq酶的抗干扰能力提出严苛要求。如何在无甘油、可冻干的前提下，依然保持优异的抑制物耐受性和合成能力，成为下游企业开发分子POCT产品时亟待攻克的技术难点。

三、翌圣解决方案：ZymeEditor™改造 + 无甘油工艺，推出14331

依托翌圣ZymeEditor™酶改造平台，研究人员基于DNA聚合酶的结构解析与多来源酶序列比对，通过定点诱变、定向筛选、压力测试及酶蛋白片段重组等多种技术手段，对Taq DNA聚合酶进行全方位定向改造，并借助MTPS高通量筛选技术，从热稳定性、亲和力、聚合活性、外切活性等多维度筛选，获得了一款支持拭子、血液等复杂样本直接扩增的Taq酶。

再结合无甘油分子酶研发、生产平台，通过物料、环境、工艺、过程、质量等多环节把控，目前已实现该无甘油分子酶的规模化生产。通过透析工艺小试和切向流过滤工艺放大，在完整保留原有耐抑制突变全部序列与蛋白构象的前提下，去除体系内甘油组分，正式推出这款无甘油液体可冻干热启动Taq酶——Hieff UNICON^® Robust Hotstart Taq DNA Polymerase, Glycerol-free ( 20 U/μL)（Cat#14331）。

14331产品核心特点：

（1）无甘油液体可冻干，专为冻干试剂生产设计；

（2）耐受性强，适配拭子、血液等复杂临床样本，支持冻干球使用核酸溶液全体系复溶；

（3）抗体介导热启动，特异性好、灵敏度高；

（4）稳定性好，37℃放置7天、冻融20次，酶活保持90%以上。

四、数据展示

●1、稳定性展示

将两批次14331分别在37℃和-20℃条件下放置，考察产品的热加速稳定性与反复冻融稳定性。结果显示：14331在37℃条件下放置7天、反复冻融20次后，酶活均保持在正常保存条件下的90%以上，产品稳定性好。

图1. 两批次14331在37℃热加速和反复冻融稳定性测试

●2、非洲猪瘟病毒冻干球检测

项目	内容
试剂	将14331搭配qPCR反应buffer、非洲猪瘟病毒引物探针和冻干保护剂进行冻干，制备成qPCR冻干微芯（25 μL/T）。
模板	养殖场收集的8例非洲猪瘟真实样本，使用磁珠法提取核酸（400 μL全血样本，70 μL终体积洗脱）。
检测	分别使用5 μL和25 μL核酸溶液对冻干微芯进行复溶，不足25 μL体积加水补足。
结果	14331体系qPCR冻干微芯，使用全核酸复溶（25 μL）相较5 μL核酸溶液上样量，Ct值提前2-4个，体系耐受性强，有助于提高单个反应的检测灵敏度。

表1. 使用14331体系冻干微芯检测8例非洲猪瘟真实样本

●3、HPV冻干球检测

项目	内容
试剂	将14331搭配qPCR反应buffer、HPV引物探针和冻干保护剂进行冻干，制备成qPCR冻干微芯（15 μL/T）。
模板	98例HPV临床样本，使用磁珠法提取核酸（200 μL样本，100 μL终体积洗脱）。
检测	使用15 μL核酸溶液对冻干微芯进行全复溶检测。
结果	14331体系冻干微芯，检测98例HPV临床样本，使用全核酸复溶（15 μL），与友商试剂相比检出率均为100%，且Ct值更有优势。

表2. 使用14331体系冻干微芯检测98例HPV临床样本

五、数据展示

翌圣生物提供从无甘油可冻干分子酶原料、冻干保护剂到可冻干qPCR/RT-qPCR预混液的一站式方案，支持客户冻干试剂从原料筛选、配方调试到工艺落地。

此外，翌圣生物设立了IVD RDC（IVD Research Development Center），通过深度参与IVD客户的研发与工艺开发流程，提供更好的服务与解决方案，帮助客户解决痛点问题，加速产品的商业化转化。

●相关产品推荐

产品类型	产品描述	产品名称及定位	货号
可冻干单酶原料	Taq酶	Hieff Unicon^® Robust Hotstart Taq DNA Polymerase, Glycerol-free ( 20 U/μL) 耐受性强	14331ES
可冻干单酶原料	Taq酶	Hieff Unicon^® Hotstart J-Taq DNA Polymerase, 6U/μL，Glycerol-free 多重扩增能力强	13705ES
可冻干单酶原料	Taq酶	Hieff Unicon^® Hotstart J-Taq DNA Polymerase, Glycerol-free (40U/μL) 13705高浓度版本	14326ES
可冻干单酶原料	Taq酶	Hieff UNICON^® HotStart E-Taq DNA Polymerase, Glycerol-free（5U/μL) 灵敏度高	14316ES
可冻干单酶原料	逆转录酶	Hifair UCF. ME^® Advanced Reverse Transcriptase, Glycerol-free（200U/μL) 高洁净度	14617ES
可冻干单酶原料	逆转录酶	第五代耐热逆转录酶（无甘油版）通用款	11301ES
可冻干单酶原料	UDG酶	Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile (Glycerol-Free)	10707ES
可冻干单酶原料	RNase抑制剂	Murine RNase Inhibitor (200 U/μL, Glycerol-free)	10703ES
qPCR试剂	可冻干/冻干	Hieff Unicon^® Lyo-Ready I TaqMan Multiplex qPCR Mix	11893ES
qPCR试剂	可冻干/冻干	八联排冻干微芯	11893ES0C
RT-qPCR试剂	可冻干/冻干	Hifair^® Lyo-Ready I Multiplex One Step RT-qPCR Kit（UDG plus)	16645ES
RT-qPCR试剂	可冻干/冻干	八联排冻干微芯	16936ES