RNase R(Ribonuclease R, RNase R)是一种来源于大肠杆菌的Mg2+依赖性3'→5'核糖核酸外切酶,它能消化所有的线性RNA,不易消化circRNA、套索RNA或3’端突出末端少于7 个核苷酸的双链RNA分子。 RNase R常用于去除线性RNA分子,实现富集circRNA和套索RNA等非线性RNA的目的。
主要应用场景为:
1)基因表达研究;
2)可变剪切研究;
3)从生物样本中富集 circRNA;
4)识别内含子套索结构 RNA;
5)鉴定外显子 circRNA。
蛋白纯度(SDS-PAGE)≥95%;
无核酸外切酶残留;
与竞品相比,产品消化线性RNA能力相当;
与竞品相比,产品对circRNA富集作用相当
1、蛋白纯度(SDS-PAGE)≥95%
图1:蛋白纯度检测:使用SDS-PAGE技术检测产品的蛋白纯度,从左到右依次为相同产品浓度下不同体积(1 μL,2 μL,3 μL)的结果,结果表明翌圣RNase R产品蛋白纯度≥95%。
2、无核酸外切酶残留
图2:核酸外切酶残留检测:将20 U 翌圣RNase R加入到 0.5 μg λDNA- Hind Ⅲ digest中,于37℃孵育4小时,之后进行琼脂糖凝胶电泳 ,结果显示DNA 条带未发生变化,说明翌圣RNase R产品无核酸外切酶残留。
3、与A进口品牌RNase R产品消化线性RNA能力相当
图3:翌圣RNase R(Cat#14606ES)产品与A进口厂家RNase R产品消化线性RNA能力比较:将翌圣RNase R(Cat#14606ES)产品与A进口厂家RNase R产品分别投入含有线性RNA底物的反应体系中进行反应,结果显示当RNase R产品的投入量达到2-4 U时,可观察到RNA条带变微弱甚至消失,表明RNase R对线性RNA分子具有消化作用,且翌圣RNase R产品与A进口厂家RNase R产品对线性RNA分子的消化能力相当。
4、与A进口品牌RNase R产品对circRNA富集作用相当
图4:翌圣RNase R(Cat#14606ES)产品与A进口厂家RNase R产品对circRNA的富集作用比较:将翌圣产品与A进口厂家RNase R产品分别投入含有circRNA底物的反应体系中进行反应,结果显示经过翌圣RNase R产品与A进口厂家RNase R产品处理后的RNA条带亮度基本无差别,表明circRNA能耐受RNase R的消化。以上结果证实翌圣产品与A进口厂家RNase R产品均能有效用于circRNA富集。
-25 ~ -15℃保存,有效期1年。