推荐应用
Hieff® Superfast DNA Methylation Bisulfite Kit超快速DNA亚硫酸氢盐转化试剂盒（柱式）可以快速地将DNA样品中的未甲基化胞嘧啶转化成尿嘧啶而甲基化胞嘧啶维持不变，双链DNA经过高温亚硫酸氢盐处理后，双链DNA解链变成单链，在HSO3-作用下，导致胞嘧啶残基发生脱氨基反应并将它们转化为尿嘧啶，甲基化修饰的残基保持不变。进而在后续PCR扩增过程中，尿嘧啶会被胸腺嘧啶(T)取代。转化反应时间仅需5 min；DNA投入量范围100 pg-2 μg; 未甲基化的胞嘧啶转化效率≥99%。转化后的产物适用于PCR扩增和NGS测序等下游应用。
- 样本适用范围广：可满足100 pg-2 μg样品的转化
- 转化效率高：转化率≥99.5%
- 转化速度快：5min内可完成转化
- 样本损伤小：能最大程度保持DNA的完整性
图1：使用12225与竞品Q和竞品Z转化试剂盒进行头对头对比，转化样本为200 ng和2 μg的FFPE DNA，FFPE DNA中参入1%λDNA，转化后的样本采用甲基化单链DNA建库（12221ES），测序结果如下：不同投入量的FFPE DNA中λDNA C的转化率＞99.5%,12225转化率与竞品Q和竞品Z相当。
图2：测试采用的DNA样本，300 ng样本为不含甲基化LambdaDNA，800ng样本为人基因组DNA，转化后采用Qubit ssDNA定量，洗脱体积均为30μL，转化后的产物采用甲基化转化特异性引物探针PCR，片段大小为286bp，扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳，结果如下：12225的样本回收率优于竞品Z和竞品F，且转化后的甲基化特异性引物扩增效果最优。
12225-A转化液室温避光保存，其他组分室温保存，有效期12个月。
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