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11145ES反应结束无扩增曲线出现

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2026-08-24

反应循环数不够,可适当增加循环次数。一般设置为 40,需注意过多的循环会增加背景信号,降低数据可信度;
确认程序中是否设置了信号采集步骤。三步法扩增程序应该将信号采集设置在 72℃延伸阶段, 两步法一般在退火延伸阶段收集;
确认引物是否降解。长时间未使用的引物应先通过PAGE 电泳检测完整性; 模板浓度太低。减少稀释度重复实验;
模板降解。重新制备模板。

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