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为什么熔解曲线是单峰，但 Tm 在 80℃之前？
为什么熔解曲线是单峰，但 Tm 在 80℃之前？
15
2026-08-24
可能原因：
扩增产物是完全的引物二聚体，可能是未加模板。
注：若 microRNA，则结果正常（做 microRNA 定量时存在引物二聚体。micro RNA 反转录后定量， 产物在 80-90bp 左右，峰对应 Tm 值为 70-80℃，若有引物二聚体存在，引物二聚体大小只有几十bp，峰对应 Tm 值也在 70-80℃之间。故会在 80℃以前出现双峰）。
解决方案：
进行高分辨率琼脂糖电泳，检测有无目的条带，以确定模板是否加入。优化方法：新配制无误的反应体系，重新实验。
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编号
名称
11199ES
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗体法，Low Rox)
11200ES
Hieff UNICON® qPCR SYBR Green Master Mix ( 抗体法，High Rox)
11202ES
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox Plus)
11203ES
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox Plus)
11204ES
Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Rox Provided Seperately)
11184ES
Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix
11185ES
Hieff UNICON® Advanced qPCR SYBR Master Mix
11188ES
Hieff UNICON® ColorGPS qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox)
11189ES
Hieff UNICON® ColorGPS qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox)
11190ES
Hieff UNICON® ColorGPS qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox)
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