表1. 普通款和热敏款蛋白酶K特点比较
上新 | 蛋白酶K(Proteinase K)灭活太麻烦？热敏版55℃ 10分钟搞定！
在分子生物学研究领域，蛋白酶K凭借卓越的蛋白降解性能，始终是核酸提取与样本裂解等核心实验步骤的关键工具。其通过高效裂解细胞并降解蛋白质，为核酸的快速释放与纯化奠定基础。然而，传统蛋白酶K在实际应用中暴露出显著的技术瓶颈：灭活过程复杂且风险高。无论是采用苯酚/氯仿抽提的多步骤纯化流程，还是高温处理引发的样本降解风险，都可能导致实验周期延长、结果重现性降低，进而影响后续数据分析的准确性与可靠性。
为突破这一技术壁垒，翌圣生物成功研发并推出热敏蛋白酶K（Thermolabile Proteinase K，Cat#14809）产品，该产品只需在55℃条件下加热10分钟即可实现完全灭活，无需额外的核酸纯化步骤，有效避免了酶残留对下游实验的干扰。例如：Thermolabile Proteinase K应用于直扩PCR、DNA&RNA建库等实验中，可省略多次纯化流程，有效降低核酸损耗，提升样本利用率；应用于甲基化DNA分析过程中，通过精准控制酶解条件，避免因过度消化导致的甲基化位点破坏，确保实验结果的准确性与可靠性。
产品简介
Thermolabile Proteinase K
Thermolabile Proteinase K（TLPK）是通过基因工程技术改造获得的重组丝氨酸蛋白酶，保持了与野生型版本相似的活性和特异性，具备广泛的切割活性，能够高效水解多种类型的肽键。在理化性质方面，TLPK展现出良好的缓冲液兼容性，可在多种缓冲体系中保持活性。其最适反应条件为pH 7.0-9.5、温度20-40℃，在此区间内能够发挥最佳效能。该酶具备优异的热敏感性，只需在55℃条件下温育10分钟即可完全热失活。
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产品名称 |
蛋白酶K |
热敏蛋白酶K |
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反应条件 |
在 20 - 60℃ 、 pH 在 7.5 - 12.0条件下获得最佳活性。 |
在 20 - 40℃ 和 pH 7.0 - 9.5 条件下获得最佳活性。 |
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灭活条件 |
95°C for 10 minutes。 |
55°C for 10 minutes。 |
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优势 |
提取来源，价格便宜； 应用场景成熟：核酸提取、组织消化等。 |
可以被完全灭活，从而不会干扰后续的实验步骤； 适用于热敏感样品，可以在较低的温度下进行消化，从而保护样品的完整性； 应用场景：甲基化DNA分析（避免过度消化影响甲基化位点）、PCR直扩、DNA&RNA建库（可快速灭活，支持一管式反应）等。 |
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局限性 |
反应温度和灭活温度较高，可能破坏样品中的某些组分。 |
在需要长时间或较高温度处理的实验中，如组织消化、石蜡包埋样本脱蜡后的蛋白消化，TLPK 可能不适合，因为它在高温下易失活。 |
消化能力强、热敏感
分别使用翌圣及进口品牌Supplier A的TLPK处理限制性内切酶PvuII后，使用处理后的PvuII对λDNA进行处理，结果显示翌圣TLPK可有效抑制PvuII活性，且55℃条件下温育10分钟可使TLPK完全热失活，对后续反应体系中的添加的蛋白无影响。
图1.消化能力与热敏感性能验证
无核酸外切酶、切口酶、RNase残留
将0.12 U TLPK分别与核酸底物孵育，并通过琼脂糖凝胶电泳分析谱带变化。实验结果表明，翌圣的3个批次TLPK均未检测到核酸外切酶、切口酶或RNase残留，为实验结果的准确性和可靠性提供了有力保障。
图2.核酸外切酶、切口酶、RNase残留结果验证
为满足多样化实验需求，翌圣生物精心推出蛋白酶K系列产品，涵盖普通型与热敏型两大品类。普通型蛋白酶K适用于常规蛋白降解场景，而热敏型产品则凭借快速热灭活特性，为下游分子生物学实验提供高效解决方案，为科研工作者提供精准适配的实验工具选择。
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
产品特点 |
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10401ES |
100mg/1g/5 g/100g |
粉末状，可以根据实验要求，配制成目标浓度 |
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10412ES |
1 mL/10 mL/25 mL/500 mL |
液体，免配制，使用起来更方便 |
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10410ES |
1 mL/5 mL/100 mL/1000 mL |
极低的背景菌残留，更适合病原微生物核酸提取 |
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14809ES |
30 U/120 U |
热敏款，适用于反应后需在温和条件下去除蛋白酶K活性的场景或热敏感样本的处理 |
