本试剂盒采用比色法测定丁酰胆碱酯酶（B-CHE）的活性，测定原理如下：丁酰胆碱酯酶水解丁酰胆碱生成胆碱及乙酸，胆碱可以与巯基显色剂反应生成TNB黄色化合物，根据颜色深浅进行比色定量，水解产物胆碱的数量可以反应胆碱酯酶的活力。
该方法的优点包括快速简便，适用于检测动物血清/浆、组织、细胞、各种体液等样本中的丁酰胆碱酯酶（B-CHE）活力。
产品信息
| 货号 | 60429ES50 |
| 规格 | 50 T |
| 检测范围 | 0.01-5.0 U/ml |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 装量 | 储存条件 | 备注 |
| 60429ES-A | 标准品 | 粉剂3支 | 2～8℃ | Part1 |
| 60429ES-B | 底物 | 粉剂2支 | 2～8℃ | Part1 |
| 60429ES-C | 显色剂贮备液 | 3mL | 2～8℃避光 | Part1 |
| 60429ES-D | 抑制剂 | 液体1支 | 室温 | Part2 |
| 60429ES-E | 透明剂 | 6 mL | 室温 | Part2 |
| 60429ES-F | 生理盐水 | 60 mL液体2瓶 | 室温 | Part2 |
备注：试剂一为混悬液，使用前需混均匀，否则结果会有偏差。
试剂一：用时取标准品1支加生理盐水10 mL混匀配成1 μmol/mL标准品应用液，现用现配。
试剂二：用时每支粉剂加生理盐水20 mL，现用现配，配好后2～8℃可保存两周。
试剂三：用时以生理盐水1︰9稀释，配成显色应用液。需多少配多少，也可以一次配成30 mL，避光冷藏可保存3个月。
使用说明
1.仪器试剂准备
含412 nm波长的分光光度计、0.5 cm光径比色皿（或酶标仪、96孔板）、37℃水浴锅或恒温箱、台式低速离心机、各种规格移液器、双蒸水、涡旋混匀器、试管或离心管、蛋白测定试剂。
2.样本前处理
1）组织样本：
准确称取组织重量，按重量(g)：体积(mL) = 1：9的比例,加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10分钟，取上清，即为 10%匀浆上清液。
2）血清样本：
取抗凝全血1000～1500转/分，离心10分钟，取上层血浆。也可测血清，测时将血清(浆)用生理盐水1︰19稀释；
3）全血样本：
取0.1 mL抗凝全血加生理盐水至10 mL按1︰99稀释，取a mL(一般取0.1 mL)检测，每个样本取样前必须充分混匀。
3.操作表
| 试剂 | 空白管 | 标准管 | 测定管 | 对照管 |
| 样本(mL) | a | |||
| 1 μmol/mL标准品应用液(mL) | a | |||
| 双蒸水(mL) | a | |||
| 底物缓冲液(mL) | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 显色应用液(mL) | 0.5 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 混匀，37℃准确反应6分钟。 | ||||
| 抑制剂(mL) | 0.03 | 0.03 | 0.03 | 0.03 |
| 透明剂(mL) | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
| 样本(mL) | a | |||
| 混匀，静置15分钟，波长412 nm，0.5 cm光径，双蒸水调零，测定各管吸光度值。 | ||||
备注：
1）对照管必须每个样本都做，因为每个样本对照管的吸光度差异较大。
2）取样量参考：①大鼠血清测试前用生理盐水20倍稀释，参考取样量为30～50 μL；②10%脑组织匀浆的参考取样量为30～50 μL；③1︰99稀释后的全血稀释液取0.1 mL。
4.计算公式
1）组织匀浆中丁酰胆碱酯酶的计算：
定义：每毫克组织蛋白样本在37℃保温6分钟，水解反应体系中1 μmoL基质为1单位。
B-CHE活力 (U/mgprot)= （测定OD值−对照OD值）/（标准OD值−空白OD值）×标准品浓度 (1 μmol/mL)÷ 待测样本蛋白浓度 (mgprot/mL)
2）血清中丁酰胆碱酯酶的计算：
定义：每毫升血清样本在37℃保温6分钟，水解反应体系中1 μmoL基质为1单位。
B-CHE活力 (U/mL)=（测定OD值−对照OD值）/（标准OD值−空白OD值）×标准品浓度 (1 μmol/mL)×样本测试前稀释倍数
3）全血中丁酰胆碱酯酶的计算：
定义：每毫升全血在37℃保温6分钟，水解反应体系中1 μmoL基质为1单位。
B-CHE活力 (U/mL)=（测定OD值−对照OD值）/（标准OD值−空白OD值）×标准品浓度 (1 μmol/mL)×样本测试前稀释倍数
2～8℃保存，有效期3个月。
