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400-6111-883
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UCF.ME® mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade
产品货号:10612ES84
产品规格:2000 U
产品价格:¥ 985
类别:RNA合成

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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    UCF.ME® mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase GMP-grade

    UCF.ME® mRNA Cap 2氧甲基转移酶GMP级

    10612ES84

    2000 U

    985

    10612ES92

    10000 U

    4285

    10612ES97

    50000 U

    18585

    10612ES98

    250000 U

    74345


    产品描述

    mRNA Cap 2氧甲基转移酶(UCF.ME®  mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase)是一种来自于牛痘病毒的重组蛋白。该酶可以在RNA的5´末端紧挨帽结构的第一个核苷酸的2´-O位置处添加一个甲基基团。该酶利用SAM作为甲基供体来甲基化加帽RNA,从而形成Cap1结构。Cap1结构能增强mRNA的翻译效率,因此可有助于改善mRNA转染和显微注射实验中的表达。该酶需要有m7GpppN即7-甲基鸟苷帽结构的RNA作为底物。

    本品是按照GMP工艺要求生产,产品以无菌液体形式提供,可应用于体内/体外翻译前mRNA的Cap1加帽反应。


    产品性质

    英文名(English Name

    UCF.METM mRNA   Cap 2´-O-Methyltransferase

    来源(Source

    重组E.coli

    宿主核酸残留(Host   nucleic acid residue

    <10fg/U

    宿主蛋白残留(Host   protein residue

    <50ppm

    病原体(HBV/ HCV/HIV)检测

    无检出

    内毒素残留(Endotoxin   residue

    <0.05EU/1000U

    支原体检测(Mycoplasma   detection

    无检出

    无菌检测(Sterility testing

    无检出

    纯度(Purity

    ≥95%SDS-PAGE

    储存缓冲液(Storage Buffer

    20 mM Tris-HCl   pH8.00.1mM EDTA1mM DTT100mM NaCl50%v/v)甘油,0.1%v/vTrion X-100

    活性单位定义(Unit Definition

    一单位(U)定义为:在37℃条件下1h内甲基化10pmol80nt带帽RNA转录物所需的酶量。


    运输和保存方法

    冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。推荐分装冻存,避免反复冻融。


    产品组分

    编号

    组分

    产品编号/规格

    10612ES84

    10612ES92

    10612ES97

    10612ES98

    10612

    mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μL)

    40 μL

    200 μL

    1 mL

    5 mL

     

    使用方法

    1、使用RNase-free 水将适量 Capped RNA 稀释至16μl;

    2、将稀释的RNA 在65℃条件下加热处理5min,反应后冰上放置 5min;

    3、按下表(1)配置反应体系(适用于10μg以内Capped RNA的甲基化反应);

    4、37℃条件下孵育1h(对与目的片段长度小于200nt RNA,可将孵育时间增加到2h);

    5、10×Capping Buffer的配置如下:500mM Tris-HCl、pH8.0、50mM KCl、10mM MgCl210mM DTT。

    1:20μL反应体系配置

    体系组分

    20μl(Total)

    Denatured Capped RNA

    16μl

    10x Capping Reaction Buffer

    2μl

    SAM (4 mM)

    1μl

     mRNA Cap 2´-O-Methyltransferase (50 U/μl)

    1μl

     

    注意事项

    1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2、用于实验反应的RNA在用之前应进行纯化处理并溶于RNase-free water且溶液中不能含任何的EDTA和盐离子;

    3、反应之前推荐65℃加热5min以去除RNA的二级结构。如果转录产物的5´端结构复杂,可将时间延长至10min;

    4、SAM试剂在pH 7–8,37°C条件下稳定性较差,需要现用现配。可预先计算好所需SAM的用量,在反应前将32 mM的储备液稀释成4 mM的工作液。为防止SAM降解,工作液应保存于冰上。
    5、本产品仅作科研用途!


    HB210708