本试剂盒含1-1000个细胞样本的逆转录试剂以及后续的建库试剂盒，试剂盒为酶切法DNA建库试剂盒。产品更高，能保留RNA样本的5’和3’UTR区域。但是相对而言，会增加TSO以及polyA尾的序列，影响有效数据量。

Hieff NGS® Single Cell/Low Input RNA Library Prep Kit是兼容Illumina®和MGI®双平台，可以对1~1000个细胞或者10 pg~10 ng的总RNA进行测序文库构建的试剂盒。本试剂盒是以Oligo (dT) Primer为引物，利用逆转录酶的末端转移酶活性即Template-switching活性在cDNA的3’端添加接头序列，PCR扩增以这个接头序列进行全长cDNA的合成，完成全长cDNA的富集，然后对获得的全长cDNA扩增产物进行酶切法文库构建，与传统的建库方法比较，本品采用高质量的片段化酶，同时简化操作流程，将片段化模块与末端修复模块合二为一，极大的降低了建库的时间和成本，来进行基因表达差异、可变剪接、融合基因等遗传调控信息分析。

• 样本投入量范围广：适用1-1000个细胞投入量或者10 pg-10 ng total RNA建库。
• 细胞投入建库，操作简单：直接投入细胞建库，无需核酸提取步骤。
• 兼容96孔板/384孔板细胞样本：样本可通过显微切割获取或者直接孔板细胞培养获取。
• 逆转录后，一链cDNA为DNA/RNA杂合链。
• 含除样本外的全套建库试剂：试剂盒含全长cDNA扩增以及后续酶切DNA建库试剂盒。

1. cDNA扩增产物检测

使用2100Agilent 2100 Bioanalyzer的High Sensitivity DNA Chip检测取1ul纯化后的cDNA扩增产物，1个293 T 细胞和10pg的293 Total RNA，同时扩增18个循环后，峰图分析如图，NTC是无模板阴性对照。

图 cDNA扩增产物检测

2. 测序数据分析

-25~-15℃保存。