产品简介
本品是一款即用型、快速高效的Western Blot转印膜封闭液, 采用无蛋白配方, 避免了抗体与封闭剂的非特异结合,最大程度地降低了背景。同时,本封闭剂无内源的磷酸化蛋白及生物素,对磷酸化特异抗体及生物素检测也不会产生干扰。本封闭剂不与蛋白产生非特异性结合,因而只封闭膜而不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,大大提高了抗体检测灵敏度。实验表明,本封闭剂对许多抗体都有不同程度的信号增强作用。然而这种信号增强作用因抗体而异,对某一特定抗体,并不一定具有确定的信号增强作用。
本产品可用于蛋白免疫印迹(WB)、免疫组化 (IHC) 及免疫荧光 (IF) 实验的封闭操作。
翌圣为您提供Western Blot实验整体解决方案,相关产品选购请参考:WB实验系列产品-选购指南
产品特点
1. 快速高效:5~15 min快速完成封闭,只结合封闭转印膜而不结合蛋白,因此不会屏蔽样品蛋白的抗体识别位点,与传统的脱脂奶粉和 BSA 封闭相比信噪比更高。
2.方便快捷:无需稀释,即取即用。
3.性能可靠:无蛋白配方,与抗体无交叉反应。
4.应用范围广:无磷酸化蛋白,无生物素,尤其适合磷酸化特异抗体及生物素检测系统。
5.节省抗体:使用本封闭剂后,所需的最适抗体浓度低于常规使用浓度,可大大节省抗体使用量。
产品信息
货号 |
36128ES60 |
36128ES76 |
规格 |
100 mL |
500 mL |
储存条件
2~8℃保存,有效期1年。
使用方法
1.完成转膜后,将转印膜放入到杂交孵育盒中,加入10-20 mL无蛋白快速封闭液,置于摇床轻轻摇动,室温封闭约10 min。
2.封闭后的膜即可用于一抗孵育等后续实验。
注意事项
1. 使用本品通常封闭5-15 min均可。经多种抗体的测试封闭10 min的效果显著优于常规的BSA封闭1 h。对于一些背景非常高的抗体,可以尝试将封闭时间延长为30~60 min。如有特殊需要也可4℃封闭过夜。
2. 没有任何一种封闭剂能适合所有抗原和抗体的检测系统。如出现本试剂不适合的抗体,请替换使用其它种类的封闭剂如BSA或脱脂奶粉等。
3. 信号弱或者无信号:有可能是上样量不足;转膜效率低;抗体效价低,特异性差等原因造成,需要根据实验情况优化实验条件。
4. 背景高:有可能是抗体使用量过多;膜洗涤时间不足;抗体和封闭液发生交叉反应;试剂或仪器设备被污染等原因造成,需要根据实验具体情况进行调整。
5. 本产品仅作科研用途。
6. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
附录1 其他封闭液产品选购表
货号 |
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名称 |
快速封闭液 |
脱脂奶粉 |
牛血清白蛋白 |
正常驴血清 |
规格 |
100 mL/500 mL |
100 g/500 g |
25 g/50 g/100 g/500 g/1 kg |
1 mL/10 mL |
优点 |
干扰少,背景低,封闭仅需10 min |
质量稳定,性价比高 |
附录2 WB全实验流程产品推荐
实验步骤 |
重点推荐试剂 |
样品制备 |
RIPA裂解液(强)(Cat#20101ES) |
WB/IP裂解液 (Cat#20118ES) |
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磷酸酶抑制剂混合物(100×, 储存液)(Cat#20109ES) |
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蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free,迷你型,片剂(Cat#20123ES) |
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蛋白酶抑制剂Cocktail, EDTA-free,100×DMSO储液(Cat#20124ES) |
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去乙酰化酶抑制剂 Cocktail (100× in 70% DMSO)(Cat#20140ES) |
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蛋白定量 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(即用型)(Cat#20200ES) |
BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)(Cat#20201ES) |
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Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Cat#20202ES) |
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PAGE凝胶快速制备试剂盒(Cat#20324ES-20327ES) |
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10×快速电泳液(Cat#36127ES) |
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高分辨率预制胶(Bis-Tris)(Cat#36259ES-36280ES) |
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三色预染蛋白Marker(8-180 kDa)(Cat#20350ES) |
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凝胶染色 |
考马斯亮蓝快速染色液(无需加热)(Cat#20308ES) |
考马斯亮蓝快速染色液(8分钟)(Cat#20309ES) |
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转膜 |
10×快速转膜液(Cat#36123ES) |
0.45 μm PVDF 膜(1 卷, 30 cm x 3 m)(Cat#36125ES) |
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0.22 μm PVDF 膜(1 卷, 30 cm x 3 m)(Cat#36126ES) |
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封闭 |
快速封闭液(Cat#36122ES) |
牛血清白蛋白(Cat#36101ES) |
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小鼠免疫球蛋白G(Cat#36111ES) |
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蛋白检测 |
ECL化学发光超敏显色试剂盒(Cat#36208ES) |
增强型ECL化学发光检测试剂盒(Cat#36222ES) |
Ver.CN20250107