可能原因：
模板量太低（CT 值 35 左右）。推荐 Ct 值：15＜Ct＜30。原因：Ct 值太大（如 Ct＞30），刚进入指数扩增期几个循环就停止了反应，故无法到达平台期。
b）循环次数太少（30 cycles）；循环次数过少（如 35）导致刚进入指数扩增期几个循环就停止了反应，故无法到达平台期。
c）试剂扩增效率低（CT 小，但无法达到平台期，曲线比较“趴”）。
解决方案：
提高模板量；参考 Q1 的优化方法。
提高循环次数；推荐循环数：一般 40。低丰度基因可设 45。
做标准曲线测定扩增效率，若确实偏低，则换试剂。
d）增加 Mg2+浓度（会增加非特异扩增）