核酸残留是生物样本制备中常常遇到的问题。在蛋白纯化的过程中，如果您提取的蛋白粘度很高、蛋白纯化的得率很低、蛋白检测的结果很差，那么您的样本可能遭受了核酸残留的污染。

一、快速解决核酸残留问题，能带来什么收益？

（1）契合病毒文库构建，提高测序覆盖率

研究者提供了一种可获得HIV测序文库的方案HIV-SMART，其中全能核酸酶的运用，可显著提高HIV病毒测序覆盖度，且不影响病毒核酸的回收率。如下图：

图1. （+）添加和（-）不添加全能核酸酶处理的CHU1756NGS覆盖图^[1]

（2）降低细胞破碎后的粘度

全能核酸酶可以降解所有形式的核酸，降低细胞裂解液的粘度，提高蛋白得率，改善分离效果，使之易于过滤（尤其是超滤），利于下游层析纯化操作。

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图2. 细胞裂解液Benonase处理（A）和未处理（B）比较图

（3）提高生化分析样品的回收率

在ELISA、色谱分析、双相电泳和足迹分析等过程中，用全能核酸酶处理含有核酸的蛋白样品，可提高分辨率，并提高回收率。

图3. 小鼠脑核蛋白Benonase处理（A）和未处理（B）双向电泳比较图^[2]

（4）核酸去除已经走入CAR-T治疗相关行业（慢病毒包装）

二、翌圣全能核酸酶，匹配市场应用，快速解决核酸残留！

翌圣生物研发团队利用一流的基因工程改造技术，研制而成的核酸去除的“终极武器”—全能核酸酶，可高效降解任何形式（双链，单链，线状，环状）的DNA和RNA而没有蛋白裂解活性，能有效降低蛋白样品粘度，去除蛋白样品中核酸的残留，且无蛋白酶活性残留。既保证了产品的纯度与酶活，又确保了产品的稳定性，目标客户攘括工业端与科研端两大科学研究链，可满足广大生物研究者的基本需求。

（1）严格把控，品质优先

图4. 核酸酶纯度验证（Purity＞90%）及全能核酸酶酶活效率验证（＞250U/mg）

（2）核酸酶超强特性

a、耐受性强

能够与多种细胞裂解液同时使用，如RIPA；与含有多种离子和非离子型去污剂、还原剂的蛋白提取试剂等兼容。

试剂	耐受剂量	耐受程度
盐酸胍	>100 mM	完全抑制 Benzonase 活性
EDTA	1 mM	部分抑制 Benzonase 活性
EDTA	5 mM	活性丧失 90%
PMSF	1 mM	不会抑制 Benzonase 活性
Triton® X-100	浓度<0.4%	保持 70%的活性
	浓度<0.4%<1%	活性急剧降低
	浓度 >1%	活性丧失 70%
SDS	浓度在 0.1%~1%	活性急剧降低
尿素	>6 M	活性急剧降低

b、操作简易，轻松使用

推荐使用条件

条件参数	最佳条件	有效条件
Mg2+	1–2 mM	1–10 mM
pH	8–9	6–10
温度	37°C	0–42°C
DTT	0–100 mM	>0 mM
巯基乙醇	0–100 mM	>0 mM
单价阳离子	0–20 mM	0–150 mM
磷酸根离子	0–10 mM	0–100 mM

推荐使用量

实验类型	蛋白电泳样品	药物生产-1g	疫苗、病毒生产-1L	细胞培养-1L
推荐产品	Benzonase（科研级，20156）	Benzonase（无内毒素级，20125）
最低要求	125 U（0.5 μL）	25 U/mL（1 μL）	0.1 U/mL（0.4 μL）	0.1 U/mL（0.4 μL）
建议用量	500 U（2 μL）	250 U/mL（10 μL）	25 U/mL（100 μL）	5 U/mL（20 μL）
孵育时间	通常作用时间37℃在15~60 min；25℃在30~120 min；
注：以上仅仅是推荐，可根据实验自主摸索最优实验条件。

（3）FAQ——如何摆脱后续核酸酶干扰？

措施1：采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制全能核酸酶活性，极端条件会造成不可逆失活，例如100 mM NaOH，70℃处理30 min等；

措施2：对于带某种标签的Benzonase核酸酶可通过相应的标签蛋白纯化树脂直接去除，去除率>95%；

措施3：对于不带标签的Benzonase核酸酶，可通过色谱纯化去除核酸酶，然后可通过检测残留活性或ELISA检测来判断去除是否成功。

三、产品订购信息

产品名称	货号	规格
Benzonase Nuclease 全能核酸酶	20156ES25	25 KU
	20156ES50	50 KU
	20156ES60	100 KU
Benzonase Nuclease (Endotoxin-free) 全能核酸酶（无内毒素）	20125ES25	25 KU
	20125ES50	50 KU
	20125ES60	100 KU
Benzonase Nuclease (GMP) 全能核酸酶（GMP级）	20127ES25	25 KU
	20127ES50	50 KU
	20127ES60	100 KU

四、文献引用

[1] Berg M G, Yamaguchi J, Alessandri-Gradt E, et al. A pan-HIV strategy for complete genome sequencing[J]. Journal of clinical microbiology, 2016, 54(4): 868-882.

[2] Jankowska U, Latosinska A, Skupien-Rabian B, et al. Optimized procedure of extraction, purification and proteomic analysis of nuclear proteins from mouse brain[J]. Journal of neuroscience methods, 2016, 261: 1-9.