产品简介

 

Cebrary® Intestinal Differentiation Medium（Human）小肠类器官分化培养基用于人小肠类器官的分化培养，可得到成熟的人小肠类器官，含有肠上皮所有细胞类型。其中人小肠类器官的建立和维持培养需使用小肠类器官生长培养基（41449ES）。

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	41450ES60
41450 - A	Cebrary® Intestinal Differentiation Medium（Human） 小肠类器官分化培养基	100 mL
41450 - B	Cebrary® Intestinal Maturation  Medium（Human） 小肠类器官成熟培养基	100 mL

 

储存条件

 

2 ~ 8℃避光储存，有效期3月。

 

使用说明

 

一、人源小肠原代培养

方法参照41449ES步骤。

 

二、人源小肠类器官分化诱导

1. 当80%的类器官直径达到100 - 150 μm时，可进行类器官的分化诱导。
2. 取出培养板，沿孔边缘吸去培养基。每孔加入预冷的500 μL DPBS，使用移液器吸头划胶使基质胶从板底脱落，将类器官转移至15 mL离心管。 
3. 补充适量DPBS吹打混匀，使类器官从基质胶中洗脱出来。 4℃，300 g，离心 5 min。离心结束弃上清，保留沉淀。
4. 补充适量DPBS，吸打混匀。4℃，300 g，离心 5 min；离心后弃去上清，保留沉淀。 
5. 使用预冷的完全培养基将基质胶稀释到70%。 
6. 向离心管中加入适量基质胶重悬至20 ± 5类器官/10 μL。 
7. 将预热的48孔细胞培养板取出，按照20 μL/孔接种类器官基质胶悬液。
8. 37℃、CO₂培养箱中孵育10 - 15 min。 
9. 孵育结束后每孔加入500 μL人小肠类器官分化培养基。 
10. 37℃、5% CO₂培养箱中继续培养，每2 - 3天更换一次新鲜培养基。
11. 6天后，弃去培养基，每孔加入300 μL人小肠类器官成熟培养基。
12. 37℃、CO₂培养箱中继续培养，每2 - 3天更换一次新鲜培养基。 
13. 6天后完全成熟的人小肠类器官，多数为出芽类器官，少数为未出芽类器官，可用于后续分析。

 

 

注意事项

 

1. 本产品仅作科研用途。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

3. 产品的分装、使用等操作需在无菌环境下进行。

 

 

Ver.CN20250415