pET系列载体是目前应用最广泛的重组蛋白表达载体,载体构建时目的片段被克隆入载体噬菌体T7转录翻译系统下,经转化在宿主T7RNA聚合酶的诱导下进行表达。T7RNA聚合酶具有超强并特异的启动T7启动子基因表达功能,当其被完全诱导时,可使宿主本身的表达几乎全部转化为目的基因的表达,诱导几个小时后即可使得最终目的基因表达产物超过细胞总蛋白的50%。
pET-28a载体带有一个N端的His/Thrombin/T7蛋白标签,同时含有一个可以选择的C端His标签。pET28a载体的单一的多克隆位方便目的片段的克隆。
质粒类型(Plasmid Type) | 细菌表达 |
表达水平(Expression Level) | 高 |
大小(size) | 5369 bp |
5'测序引物(5' Sequencing 1 Primer) | T7 Fwd |
5'测序引物序列(5' Sequencing 1 Primer Sequence) | 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3' |
抗性(Bacterial Resistance) | Kanamycin |
类型(Viral/Non-Viral) | Nonviral |
- 质粒图谱
T7 promoter 370-386
T7 transcription start 369
His•Tag coding sequence 270-287
T7•Tag coding sequence 207-239
Multiple cloning sites
(BamH I - Xho I) 158-203
His•Tag coding sequence 140-157
T7 terminator 26-72
lacI coding sequence 773-1852
pBR322 origin 3286
Kan coding sequence 3995-4807
f1 origin 4903-5358
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年,长期不用,置于-80℃保存,避免反复冻融。
[1] Liu S, Zhang J, Kherraf ZE, et al. CFAP61 is required for sperm flagellum formation and male fertility in human and mouse. Development. 2021;148(23):dev199805. doi:10.1242/dev.199805(IF:6.868)