mRNA药物生产过程中，常使用质粒作为体外转录步骤中的DNA模板，质粒线性化是质粒DNA模板制备的重要环节。这是因为环状质粒缺乏有效的终止，而RNA聚合酶又具有很高的持续合成能力，若以环状质粒作为模板，会导致转录产生不同长度的RNA产物，因而为了有效转录形成特定长度的RNA，需要使用限制性内切酶对环状质粒进行彻底线性化。

翌圣可为您提供多种GMP级别限制性内切酶，满足您的质粒线性化需求，助力您的mRNA药物研发与生产。

 

BspQI

BspQI是一种IIS类限制性内切酶，其识别序列和切割位点如下：

5'······GCTCTTC(N)↓··············3'

3'······CGAGAAG(NNNN)↑······5'

 

BsaI

BsaI是一种IIS类限制性内切酶，其识别序列和切割位点如下：
5'······GGTCTC(N) ↓···············3'

3'······CCAGAG(NNNNN) ↑······5'

 

XbaI

XbaI是一种切割位点位于识别序列内的限制性内切酶，其识别序列和切割位点如下：

5'……T↓CTAGA...…3'
3'……AGATC↑T...…5'

 

注意事项：

1. 质粒线性化所选限制性内切酶需要在启动子区域右侧、插入 DNA 片段的下游，且在插入 DNA 片段中没有该限制性内切酶识别位点。选择的限制性内切酶要能形成有义链 5’端突出结构或者平末端。

2. 为了避免蛋白及盐离子等对体系的影响，质粒线性化后建议纯化后再作为模板进行体外转录。
 

相关产品

 

产品名称	货号	规格
10×Digestion buffer 3 GMP-grade	10667ES03	1 mL
	10667ES10	10 mL
	10667ES50	50 mL
BspQI GMP-grade (10 U/μL)	10664ES76	500 U
	10664ES86	2500 U
	10664ES92	10000 U
Bsa I GMP-grade	10661ES76	500 U
	10661ES86	2500 U
Xba I GMP-grade	10662ES76	500 U
	10662ES86	2500 U