B细胞（也称B淋巴细胞，骨髓依赖性淋巴细胞），由骨髓中的造血干细胞分化发育而来，在人体内合适环境刺激下增殖分化为浆母细胞及浆细胞，而浆细胞合成和分泌免疫球蛋白，在体液免疫反应中起着至关重要的作用。B细胞可生成高亲和力抗体、免疫记忆、充当抗原呈递细胞，并分泌细胞因子（包括CCL22、CCL17、IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α、GM-CSF、IL-10、TGF-β1、IL-35）。记忆B细胞和浆B细胞可生成诸如免疫球蛋白（Ig）IgM、IgG和IgE等抗体。

• 特征：未接触过抗原的成熟B细胞；

• 表面标志：CD19+、CD20+、IgM+、IgD+、CD27-；

• 功能：在外周免疫器官中等待抗原刺激。

• 特征：终末分化的B细胞，专门分泌抗体；

• 表面标志：CD19low、CD20-、CD38+、CD138+；

• 功能：大量产生和分泌特异性抗体。

B细胞的发育和成熟主要发生在骨髓。

起始阶段，来自造血干细胞。开始重链（IgH）基因重排。

成功完成重链基因重排并表达μ重链。开始轻链（IgL）基因重排。

表面表达完整的IgM型B细胞受体（BCR）。通过中央耐受机制（如克隆清除）排除对自身抗原反应的B细胞。

表面同时表达IgM和IgD型BCR，具备完全功能。离开骨髓，迁移到外周淋巴器官（如淋巴结、脾脏）。

图1. B细胞的发育过程^[1]

浆细胞分泌抗体，用于中和病原体、激活补体系统或通过抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）机制清除病原体。

B细胞通过MHC-II分子向T细胞呈递抗原，促进T细胞的活化。

调节性B细胞（Bregs）分泌抑制性细胞因子（如IL-10、TGF-β），抑制过度的免疫反应，维持免疫稳态。

记忆B细胞在二次免疫中快速应答，提高免疫效率。

图2.B细胞功能^[2]

在没有刺激的情况下，B细胞一般不会增殖。在培养条件下并给予外源信号，B细胞能够活化并且增殖。B细胞被激活的方式有两种，分别是T细胞依赖型和非T细胞依赖型。

这种类型的活化可生成记忆和血浆B细胞。Naive B细胞与可溶性或膜结合型抗原结合，并使抗原内化。B细胞在向MHCII上呈递这种抗原，并被辅助性T细胞（Th）识别。CD40受体与配体结合需要第二种信号。另外Th细胞分泌细胞因子，其可促进B细胞分化为能够生成IgG、 IgA、或 IgE的成熟B细胞。

这种类型的活化可生成浆细胞和IgM。B细胞被细菌或病毒表面的保守重复表位活化，包括脂多糖（LPS）或DNA片段。BCR识别T细胞非依赖性抗原聚集并交联。Toll样受体（TLR）提供第二信号。活化的B细胞会产生较强的抗体反应，但不会生成记忆B细胞。

图3. T细胞依赖性和非依赖性 B细胞激活途径示意图^[3]

DC，树突状细胞；pMHC II，肽-MHC II 复合物；TCR，T细胞受体；BCR，B细胞受体

人B细胞：外周血单个核细胞（PBMCs，经Ficoll分离）或纯化的CD19⁺B细胞。纯度＞95％。

B细胞需特异性信号刺激才能增殖和分化。

将纯化的Ｂ细胞以1.5×10³个/Ｌ浓度置于24孔板的RPMI1640培养液，10% FBS， 以 0.002L/孔培养细胞。 加入以下表1中的细胞因子组合，培养4d。

浆母细胞分化，在培养第4天，收集细胞并用培养液清洗，去除CD40L，CpG，加入以下表2中细胞因子组合，促进浆细胞分化3d。