小牛肠碱性磷酸酶和虾碱性磷酸酶的差异是什么?
小牛肠碱性磷酸酶和虾碱性磷酸酶的差异是什么?
15
2026-10-10
小牛肠碱性磷酸酶(CIAP)和虾碱性磷酸酶(SAP)都可以去除载体或片段的5’-末端磷酸基团,但失活方法不同。
小牛肠碱性磷酸酶,在底物浓度高时,CIAP的最适pH约为10;底物浓度低时,最适pH约为8,但特异性比高底物浓度时低。同时,其在保存条件下极其稳定,但在螯合剂存在条件下,经65℃、30分钟加热处理99%的活性不可逆失活。失活处理时,建议试用苯酚,从而使酶完全失活。
虾碱性磷酸酶,可以在65℃ 加热 5 分钟的条件下不可逆失活。同时,在进行去磷酸化反应之后,不需要纯化产物,可直接用于后续的连接反应。虾碱性磷酸酶也可以用来降解PCR反应中的游离dNTP,用于制备测序模板和 SNP 分析。同样无需纯化,可直接用于下游实验。
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