推荐应用
BODIPY 581/591 C11 常用于研究活细胞内脂质过氧化和抗氧化性能,以及检测铁死亡 (ferroptosis)。BODIPY 581/591 C11 的发射波长为 591 nm (还原型) 或 510 nm (氧化型),激发波长分别为 581 nm (还原型) 和 500 nm (氧化型)。
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1. 储存液制备
在1 mg BODIPY 581/591 C11(705487ES)中加入198.3 μL DMSO,充分溶解混匀,得到浓度为10 mM的BODIPY 581/591 C11储存液。储存液建议置于-80°C(最佳)或-20°C保存,不要反复冻融,注意避光。
2. 工作液制备
可考虑用实验体系的无血清细胞培养基或PBS或其他相关缓冲液,稀释上述BODIPY 581/591 C11储存液至终浓度1-10 μM,具体工作液浓度请根据实验设计和实际情况进行调整。
3. 细胞染色
3.1 细胞制备:
悬浮细胞:4°C,1000 g离心3-5 min,弃去上清。加入PBS润洗2次,每次5 min。
贴壁细胞:弃去细胞培养基,加入胰蛋白酶消化细胞,制成单细胞悬液。4°C,1000 g离心3-5 min,弃去上清。加入PBS润洗2次,每次5 min。
3.2 加入1 mL上面制备的BODIPY 581/591 C11工作液,室温孵育30 min。
3.3 4°C,400 g离心3-4 min,弃去上清。加入PBS润洗2次,每次5 min。
3.4 用无血清细胞培养基或PBS或其他相关缓冲液重悬细胞,荧光显微镜或流式细胞仪检测。
【注】实际孵育时间可根据实际情况进行适当调整。以上操作供参考,具体可根据实际情况做相应变动。
-25~-15℃避光保存,有效期3年。
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