10906ES连接反应体系和反应时间以及温度对连接效率的影响大吗？
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2026-08-24
建议反应体系应控制在10 μL内，体系太小连接会受到影响。如果目的基因浓度太低，建议浓缩之后再连接，以提高连接成功率。插入片段使用量参考说明书。连接反应不可于冰上进行。室温（20-37℃）下孵育时，建议孵育时间不超过5 min，如果PCR产物浓度较低或者片段较长，则可以适当延长孵育时间，不宜超过15 min（推荐使用25℃，PCR仪控温）。
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2026-08-24
建议反应体系应控制在10 μL内，体系太小连接会受到影响。如果目的基因浓度太低，建议浓缩之后再连接，以提高连接成功率。插入片段使用量参考说明书。连接反应不可于冰上进行。室温（20-37℃）下孵育时，建议孵育时间不超过5 min，如果PCR产物浓度较低或者片段较长，则可以适当延长孵育时间，不宜超过15 min（推荐使用25℃，PCR仪控温）。
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