分选纯化磁珠回收率低可能的原因是什么?
分选纯化磁珠回收率低可能的原因是什么?
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2026-08-24
磁珠回收率低可能的原因及解决建议如下:(1)磁珠与待吸附物质(如DNA )混匀不充分,导致磁珠未能充分吸附目标物质。建议在反应体系中充分混匀,确保磁珠与待吸附物质充分接触。(2)磁珠比例选择不当,未按说明书推荐比例添加。建议严格按照产品说明书选择合适的磁珠比例。(3)孵育时间不足,影响磁珠与目标物质的结合效率。建议保证孵育时间至少5分钟,确保结合反应充分完成。(4)磁珠分选过程中操作不当,如二轮磁珠吸附时不慎吸到磁珠。建议在200 μL枪头前串联10 μL枪头用于移液,以防止吸到磁珠。(5)磁珠洗涤时使用的乙醇非现配,导致乙醇浓度过低(影响洗涤效果)。建议使用现配的乙醇,且乙醇浓度不低于70%;。(6)干燥过度:,磁珠长时间干燥导致表面龟裂,目标物质(如DNA )难以洗脱,从而降低得率。建议控制干燥时间,表面刚出现龟裂即可停止干燥。(7)洗脱液体积不足,未能完全覆盖管内磁珠,影响洗脱效果。建议确保最终洗脱液体积足以完全覆盖管内磁珠。
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