基本原理
DNA与磷酸钙的结合
在含有磷酸盐的缓冲液(HBS)中,加入氯化钙(CaCl2)溶液和含有目的DNA的溶液。
DNA分子在生理pH条件下带负电荷,而磷酸钙带正电荷,通过静电作用,DNA与磷酸钙结合。
形成DNA-磷酸钙共沉淀物
细胞吸收共沉淀物
DNA进入细胞
DNA的表达
翌圣生物的磷酸钙法细胞转染试剂,基于传统方法优化,提高转染效率,减少细胞毒性,特别适合HEK293、293T和Hela等细胞系。适用于瞬时和稳定转染,即开即用,操作简便。
产品特点
性能稳定:可在2-8℃保存,有效期2年;
转染效率高:在293T细胞上阳性率高达95%;
毒性低:对细胞基本无毒,转染后不影响细胞正常生长。
结果展示
6孔板中,使用翌圣磷酸钙法细胞转染试剂在293T细胞上转染GFP质粒, 按照转染试剂说明书进行操作;转染48 h后,荧光倒置显微镜下观察并拍照。结果显示,翌圣磷酸钙法细胞转染试剂在293T细胞上的转染效率高达95%以上。
293T细胞(6孔板)
操作方法
按照60%左右的密度种植细胞入培养皿(瓶),细胞贴壁生长12-24小时后即可准备转染;
准备1.5 mL离心管,按照下表指示,依次加入DNA、HBS和CaCl2;
吹打3-5 次后均匀加到待转染细胞的培养液中,轻轻摇动培养皿(瓶);
不同培养容器试剂使用量(仅供参考)
细胞培养试剂 |
6孔板 |
T-25培养瓶 |
10 cm平皿 |
培养基(mL) |
2 |
5 |
10 |
DNA(μg) |
2 |
4 |
7.5 |
HBS(mL) |
0.2 |
0.5 |
1 |
CaCl2(μL) |
14 |
35 |
70 |
产品信息
产品名称 |
产品规格 |
产品货号 |
Hieff Trans®Calcium Phosphate Cell Transfection Kit 磷酸钙法细胞转染试剂 |
200T |
40803ES70 |
相关产品
产品名称 |
产品规格 |
产品货号 |
100 μL/1 mL |
40802ES01/40802ES03 |
|
500 μL/5×500 μL |
40804ES76/40804ES86 |
|
Hieff Trans® Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent转染试剂 |
100 μL/1 mL |
40805ES01/40805ES03 |
100μL/1mL |
40806ES01/40806ES03 |
|
0.5 mL /1 mL |
40808ES02/40808ES03 |
|
100μL/1mL |
40809ES01/40809ES03 |
|
1.5 mL /10 mL /100 mL |
40820ES04/40820ES10 /40820ES60 |
|
10 mL /100 mL/1L |
40821ES10/40821ES60 /40821ES80 |
|
1 mL /10 mL /100mL |
40823ES03/40823ES10 /40823ES60 |