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产品名称: SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
  • 产品货号:20328ES50
  • 产品规格:1 kit (30~50 gels)
  • 产品价格:
  • 类别:蛋白电泳
   
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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    储存

    价格(元)

    SDS-PAGE Gel Preparation Kit SDS-PAGE凝胶配制试剂盒

    20328ES50

    1 kit (30~50 gels)

    4℃~25℃

    177.00

    产品描述

    蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。

    本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶设备和蒸馏水即可配胶,大大简化了制胶过程,货号20328ES50可配制30-50块常规大小的凝胶,20328ES72可配制150~250块常规大小的胶

    产品组分

    组分编号

    组分名称

    产品编号/规格

    保存方式

    20328ES5030~50 gels

    20328-A

    30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,29:1

    100 mL

    4避光

    20328-B

    4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液,pH 8.8

    70 mL

    4

    20328-C

    4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液,pH 6.8

    30 mL

    4

    20328-D

    APS 过硫酸铵

    0.5 g

    4~25

    20328-E

    TEMED 四甲基二乙胺

    0.5 mL

    4~25避光

    运输与保存方法

    室温运输。4~25保存,有效期至少6个月。

    注意事项

    丙烯酰胺溶液和TEMED有毒,请适当防护。

    APS溶液不稳定,当配制成10%溶液后,分装成-20℃冻存。尽量减少室温存放时间,以防失效。若是发现凝胶聚合时间明显延长,需要更换使用其它-20℃冻存或者新鲜配置的10%APS

    TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。

    凝胶凝聚的速度与温度、光照、以及TEMEDAPS的用量关系密切。在其他组分用量不变的前提下,可通过适当调节TEMED以及APS的用量,控制现有室温条件下凝胶凝聚的速度。可参考附件的量进行相应的调整。

    温度较低时,4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液和4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中的SDS可能析出。此时需水浴温育,并在完全溶解和混匀后使用。

    凝胶配制过程,特别是液体混匀步骤,需尽量避免气泡的产生。

    在分离胶上层进行水压时需小心操作,加水速度不宜过快。

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用方法

    1 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1

    2 按照附表2配制相应浓度的SDS-PAGE分离胶,制胶程序如下:

    2.1 将不同体积的30% Acr-Bis(29:1)分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;

    2.2 加入10% APSTEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免气泡产生;

    2.3 在装好的制胶模具中灌入适量分离胶溶液,对于mini胶,分离胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可。然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层,从而压平凝胶表面;

    2.4 静置30-60 min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面,表面凝胶已聚合;

    3 按照附表3配制SDS-PAGE浓缩胶,制胶程序如下:

    3.1 去除覆盖在分离胶上的水层。

    3.2 将不同体积的30% Acr-Bis(29:1)浓缩胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;

    3.3 加入10% APSTEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。

    3.4 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。

    3.5 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。

    3.6 静置10-20 min,等待浓缩胶聚合。

    3.7 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。

    3.8 可用电泳缓冲液吹走孔内残留的一些胶液【可选】,然后进行上样和后续的常规电泳操作。 

    附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围

    SDS-PAGE分离胶浓度

    最佳分离范围

    6%凝胶

    50-150 KD

    8%凝胶

    30-90 KD

    10%凝胶

    20-80 KD

    12%凝胶

    12-60 KD

    15%凝胶

    10-40 KD

     

     

    HB180403