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    Hieff NGS™ RNA Cleaner

 

随着转录组学的不断深入RNA的类型,表达调控以及功能的复杂程度远远超乎我们的想象。去除含量占80%以上的核糖体RNA有助于将测序集中在含量少但信息大的RNA上。目前去除rRNA主要是通过探针和RNase H联合使用的方式处理后的RNA会混杂很多消化产物酶和离子不利于后续RNA文库的构建为此翊圣生物独立研发了RNA纯化试剂盒——Hieff NGSTM RNA Cleaner。该产品是基于SPRISolid Phase Reversible Immobilization)原理,不需要增加沉淀步骤,就可以高效去除蛋白、盐离子和其它杂质,获得高纯度浓缩的RNA样本。

除此之外,翊圣生物凭借其严格的生产工艺和质量控制,充分保证了产品的性能和批次间的稳定性。

产品应用

产品适用于纯化去除rRNA后的总RNA样本,体外转录的RNA产物RNA标记产物以及合成的RNA纯化后的RNA适用RNA文库构建、RT-PCRqRT-PCR芯片分析、Northern BlotRNAi实验

产品特点:


   整个纯化过程无需离心、抽滤和沉淀,只需要简单的6步就可以获得高纯度的RNA样品。

 

1 RNA纯化流程

将稀释后的RNA样品与磁珠混合

通过磁力器进行分离,并吸除上清

80%乙醇漂洗一次

再次用80%乙醇漂洗一次

用无RNase的水进行洗脱;

磁力器分离,并转移上清   

 
 

 

Hieff NGSTM RNA Cleaner 适用于不同来源的RNA样本与同类产品相比具有更加出色的回收效率Agilent 2100 Bioanalyzer分析结果显示,使用Hieff NGSTM RNA Cleaner获得的峰值均比同类公司高而峰值的大小代表了相应分子量RNA的含量。

细胞样本总RNA纯化

 

1.HepG2-RNA样品在使用纯化试剂盒纯化前后的RNA电泳结果

L:LadderN:竞品公司;YYeasen公司;检测仪器:Agilent 2100 Bioanalyzer

拟南芥样本总RNA纯化

 

2.拟南芥-RNA样品在使用纯化试剂盒纯化前后的RNA电泳结果

L:LadderN:竞品公司;YYeasen公司;检测仪器:Agilent 2100 Bioanalyze

水稻样本总RNA纯化

 

3.水稻总RNA样品在使用纯化试剂盒纯化前后的RNA电泳结果

L:LadderN:竞品公司;YYeasen公司;检测仪器:Agilent 2100 Bioanalyzer 

    


  使用Hieff NGSTM RNA Cleaner,可以有效去除影响RT-PCR反应的抑制剂,让检测结果更加真实。如下表所示,使用相同质量的RNA样品,进行纯化前后Gapdhβ-actin的荧光定量分析,得到的Ct值纯化后比纯化前小。表明纯化后PCR可以得到更高效的扩增。

RNA样品

小鼠

拟南芥

检测基因

Gapdh

β-actin

Gapdh

β-actin

PP2A

TUB2

纯化前Ct

12.92

12.36

18.74

18.53

24.33

22.2

纯化后Ct

12.32

11.89

17.62

17.91

23.38

21.35

1:使用总RNA纯化试剂盒纯化前后,RNA样品qRT-PCR Ct值变化

   

品牌

货号

名称

规格

价格(元)

Beckman

A63987

Agencourt RNA Clean XP- cDNAcRNA体系纯化试剂盒

40 mL

7500.00

Yeasen

12602E56

Hieff NGSTM RNA Cleaner

60 mL

4266.00

常见问答:

1. RNA回收效率低或者没有。

1RNA发生降解。操作过程要严格的确保无RNase的污染。

2)样本质量低。对于需要纯化的总RNA样本,建议Agilent 2100 Bioanalyzer分析后RIN值在7.0以上。

3)洗脱效率低。80%乙醇需现用现配,放置时间过久,可能由于乙醇挥发,造成浓度降低,影响洗脱效果;

4)洗脱溶液孵育时间过短。磁珠应于洗脱液中按规定时间孵育,常规为5 min

5)磁珠过度干燥。切勿室温干燥磁珠大于10 min,过度干燥将降低洗脱效率。

2.纯化RNA中有磁珠残留。

1)磁珠分离时间过短或磁力器磁力较弱。增加分离时间或选用磁力强的磁力器,确保磁珠被磁力器全部吸附;

2)洗脱步骤中,吸取上清速度过快。缓慢吸取上清,注意切勿吸取磁珠。

3.如何检测回收后RNA的纯度?

可以通过测定A260/A280的比值来评估。

4.为什么分离后得到的RNAOD 260/280比较低呢?

A260/A280的比值容易受到PH的影响,一般来说PH越低,A260/A280的比值就越低。建议使用10 mM Tris·ClPH 7.5进行溶解,再测定。

产品订购:

产品

货号

规格

价格(元)

Hieff NGSTM RNA Cleaner

12602ES01

1 mL

366.00

Hieff NGSTM RNA Cleaner

12602ES08

5 mL

1066.00

Hieff NGSTM RNA Cleaner

12602ES56

60 mL

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Hieff NGSTM RNA Cleaner

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450 mL

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