7×24小时 服务热线:400-6111-883  翊圣微信:

    遇到支原体污染,如何挽救您无比珍贵的细胞?

 

------翊圣为您提供支原体检测、预防、去除全方位攻略!

导读:实验室和细胞工厂在细胞培养过程中,一直受到支原体污染的困惑,翊圣生物(YEASEN)的细胞房曾经也受到过支原体的污染,我们选择过很多进口品牌的清除剂对支原体进行灭杀,这些品牌很难做到整体清除。针对这个问题,经过我们多次的实验验证,推出了整体清除支原体的方案。我们的产品有:支原体检测、培养体系中支原体的清除、环境中支原体的清除(培养箱、水浴锅、超净台和细胞房)、支原体预防相关

背景

支原体污染对细胞培养造成多方面的不良影响,已经成为在细胞培养时的一个严重问题,保守估计常规细胞培养中支原体污染率为 15-35%,在某些地方甚至更高,严重干扰实验结果的可信度。因此,定期进行支原体检测,确保无支原体的细胞培养体系,才能获得准确有效的实验数据。

什么是支原体(Mycoplasma)?
又称霉形体,直径在 0.1-0.3μm,是目前发现的最小的最简单的原核生物,可以轻松地通过滤膜,混入培养系统中,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分支状等多种形态。通常依附在细胞膜表面,支原体没有刚性的细胞壁,因此普通的抗生素对它根本不起作用。
 
支原体污染的后果?
细菌和真菌造成的污染相对比较容易检测、预防和去除,然而支原体造成的污染很难察觉,即使生长密度高达 107-109CFU/ml,也没有污染迹象,如浑浊、pH 变化等。
支原体污染后导致细胞生长变慢,状态变差,不会马上使细胞致死,但会影响细胞内的各种参数,如改变细胞膜抗原性,改变细胞新陈代谢,干扰核酸的合成,改变 DNA 转染效率,导致染色体畸变等。

 


典型的支原体污染来源?

细胞之间交叉污染;
工作环境或实验器材的污染;
实验者无菌操作不佳;
培养基或其他试剂污染;
制备细胞的原始组织或器官的污染;
因此,常规的支原体污染检测以及环境支原体污染的预防已经是每个细胞培养实验室所必备的。

细胞培养遇到支原体污染,怎么办?


一、支原体检测相关产品

【原理】:通过 PCR 法检测培养细胞等生物材料中的支原体,所用引物为根据支原体 16SrRNA 序列保守区域设计,特异性扩增支原体 DNA。
【流程】:
样品制备→巢式 PCR→DNA 电泳检测
【特点】:简单快速高效,只需两步 PCR 即可,灵敏度高。包含实验所需的成套组分(如高效 PCR Mix 和阳性对照模板),PCR 扩增及电泳分析只需数个小时。
【结果判定】:是否含有相应阳性条带(详见说明书)。

【相关产品】:GMyc-PCR 支原体检测试剂盒
                        40601ES10  10 assays   327.00
【原理】:利用 Yeasen 独特的等温扩增技术,只需吸取 1μl 疑似支原体污染的细胞培养上清加入反应体系中,61℃ 孵育 45min即可,若细胞培养物被支原体污染,支原体 DNA 的保守序列会被大量、快速地扩增。
【流程】:
样品制备→61℃ 温浴→肉眼观察
【特点】:无需 PCR;无需电泳;结果肉眼可见,灵敏度高、准确性高。
【结果判定】
若反应液为蓝紫色,则判定为阴性;
若反应液为天蓝色,则判定为阳性。
                
【相关产品】
MycAwayTM 一步法快速支原体检测试剂盒
40611ES25   25T    467.00
40611ES60   100T   1537.00


二、MycAwayTM 支原体去除试剂
 

【作用原理】:MycAwayTM 支原体去除试剂是一种混合制剂,可通过抑制 DNA 和支原体生长所必须的相关蛋白合成来取得良好的支原体清除效果,且对细胞无伤害,最大程度上挽救珍贵的细胞,减少因支原体污染带来的损失。
【操作方法】:同常规抗体加入方法(仅仅稀释倍数不同而已),本品工作液为 1×。
    
图A 支原体污染细胞图片                      图B 支原体清除试剂处理后细胞图
【相关产品】:MycAwayTM 支原体去除试剂(1000×)
                        40607ES03    1ml      467.00
                        40607ES08    5×1ml    1357.00

 

【作用原理】:MRA 支原体清除试剂盒核心组分为抗生素喹啉家族的衍生物,通过抑制支原体 DNA 解旋酶去除支原体感染。推荐浓度 0.5ug/ml,能有效去除多种支原体,细胞毒性小。
【操作方法】:同常规抗体加入方法(仅仅稀释倍数不同而已),本品工作液为 1×。
    
图A 支原体污染的细胞培养物                 图B MRA去除支原体后的细胞培养物
【相关产品】:MRA支原体清除试剂盒(100×)
 Cat# 093050044  5ml   2200.00
 


三、支原体预防相关

【作用原理】:细胞培养过程中,为防止支原体污染带来的麻烦,可在细胞培养初期就加入支原体预防试剂。MycAwayTM 支原体预防试剂的主要成分与支原体去除试剂相同,但是对相应的各组分抗生素的剂量加以优化和调整。对支原体具有较好的预防作用。
【使用方法】:按1:2000比例加入即可。
【相关产品】:
MycAwayTM 支原体预防试剂(2000×)
40608ES03   1ml    387.00元
40608ES08   5×1ml  1257.00元
【工作原理】:其活性成分是季铵类衍生物,不含汞,甲醛,苯酚或酒精等刺激性物质,无毒并可以生物降解。对一般的工作台和器材表面没有任何损伤。只需轻轻一喷,就可预防工作环境支原体污染,让你的实验更放心和舒心。
【使用方法】:同酒精消毒方法。直接喷洒即可。
【相关产品】:
MycAwayTM支原体喷雾剂(即用型)
40605ES03  2×500ml   407.00元
40605ES08  10×500ml 1617.00元

 
相关产品】:
MycGuardTM-1 Solution (100×), for Disinfecting Water Bath of CO2 Incubator  1号消毒卫士(支原体污染预防)
--------预防细胞培养箱水盘污染
40609ES60 100ml  247.00元
 
MycGuardTM-2 Solution (500×), for Disinfecting Ordinary Water Bath 水浴锅2号消毒卫士(支原体污染预防
-------预防水浴锅污染
40610ES60 100ml  237.00元
 



 订购信息

产品编号 产品名称 规格 价格(元)
支原体检测
40601ES10 GMyc-PCR Mycoplasma Test Kit  GMyc-PCR支原体检测试剂盒(热销) 10 assays 327.00
40601ES20 20 assays 557.00
40611ES25 MycAwayTM -Color  One-Step Mycoplasma Detection Kit
一步法快速支原体检测试剂盒(水浴锅或PCR仪61℃60min即可)
(热销)
25T 467.00
40611ES60 100T 1,537.00
细胞培养体系中支原体清除
40607ES01 MycAwayTM Treatment (1000×)-Mycoplasma Elimination Reagent
MycAwayTM支原体去除试剂(1000×)
(热销)
100ul 168.00
40607ES03 1ml 467.00
40607ES08 5×1ml 1,357.00
细胞培养体系中支原体预防
40608ES03 MycAwayTM Prophylactic (2000×)-Mycoplasma Prevention Reagent MycAwayTM支原体预防试剂(2000×)(热销) 1ml 387.00
40608ES08 5×1ml 1,257.00
培养箱、超净台和环境中支原体清除
40605ES02 MycAwayTM  Spray (Ready-to-use) 支原体喷雾剂(即用型)(热销) 500ml 237.00
40605ES03 2×500ml 407.00
40605ES08 10×500ml 1,617.00
培养箱水盘支原体预防
40609ES60 MycGuardTM-1 Solution (100×), for Disinfecting Water Bath of CO2 Incubator  细胞培养箱水盘1号消毒卫士(支原体污染预防) 100ml 247.00
水浴锅支原体预防
40610ES60 MycGuardTM-2 Solution (500×), for Disinfecting Ordinary Water Bath 水浴锅2号消毒卫士(支原体污染预防) 100ml 237.00