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产品名称: Taq DNA连接酶(Taq DNA Ligase)
  • 产品货号:11051ES80
  • 产品规格:1000 U
  • 产品价格:
  • 类别:基因突变
   
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  • 产品信息

    产品名称

    产品编号

    规格

    价格(元)

    Taq DNA Ligase

    11051ES80

    1000 U

    346.00

    Taq DNA连接酶(Taq DNA Ligase

    11051ES84

    2000 U

    656.00

    Taq DNA连接酶(Taq DNA Ligase

    11051ES92

    10000 U

    2616.00

    产品描述

    Taq DNA Ligase是一种耐高温连接酶,它能催化与同一互补靶DNA链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸和3´-羟基之间形成磷酸二酯键。该催化反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,且两条寡核苷酸链之间没有间隙的条件下才会发生。因此,可以用它来检测单碱基替换。Taq DNA连接酶以NAD+为辅酶因子,在45℃-65℃范围内均有活性。

    产品组分

    编号

    组 分

    产品编号/规格

    11051ES80 (1000 U)

    11051ES84 (2000 U)

    11051ES80 (10000 U)

    11051-A

    Taq DNA Ligase(40 U/µL)

    25 μL

    50 μL

    5×50 μL

    11051-B

    10×Taq DNA Ligase Buffer(含NAD+

    250 μL

    500 μL

    5×500 μL

    来源

    重组E. coli 菌株,含有从Thermus aquaticus HB8中克隆的连接酶基因。

    产品应用

    1用连接酶检测反应和连接酶链式反应对等位基因进行特异性检测;

    2)通过PCR扩增掺入磷酸化寡核苷酸进行诱变;

    3)同源重组。

    单位定义

    50 μL 反应体系中,45℃条件下,孵育15 min能使50%1 μgBstEII消化的λDNA片段(12 bp粘性末端)发生连接所需要的酶量定义为1个活性单位(U)

    质量控制

    核酸内切酶活性:50 μL反应体系中,10 μL酶溶液与0.5 μg pENZuC DNA作用,37℃孵育4 h,经琼脂糖凝胶电泳,无肉眼可见的环状切口DNA出现。

    核酸外切酶活性:50 μL反应体系中,10 μL酶溶液和10000 cpm/μg放射性标记的DNA作用,37℃孵育4 h,溶液中可溶性TCA的释放量小于5.0%

    运输和保存方法

    冰袋运输。-20℃保存。长时间(大于30天)保存时,缓冲液应于-80℃保存。

    使用方法

    1)反应体系配制:

    组分

    用量

    DNA

    up to 1 µg

    10×Taq DNA Ligase Buffer

    5 μL

    Taq DNA Ligase(40 U/µL)

    2 μL

    ddH2O

    up to 50 μL

    2)反应条件:45℃温育15 min。加入终止染液(50%甘油,50 mM EDTA和溴酚兰)终止反应。

    注意事项

    110×Taq DNA Ligase Buffer中含有辅酶因子NAD+,为了延长NAD+的半衰期,Buffer应于-80℃储存;

    2Taq DNA Ligase不能替代T4 DNA ligase

    3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    HB171128