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产品名称: Hieff NGS™ RNA Cleaner
  • 产品货号:12602ES01
  • 产品规格:1 mL
  • 产品价格:
  • 类别:磁珠与建库模块
   
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    价格(元)

    Hieff NGSTM RNA Cleaner

    12602ES01

    1 mL

    2-8℃

    366.00

    12602ES08

    5 mL

    2-8℃

    1066.00

    12602ES56

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    4266.00

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    450 mL

    2-8℃

    38566.00

    产品描述

    本试剂盒利用独特的磁珠与缓冲液系统,可以特异性地吸附RNA,有效去除蛋白、盐离子和其它杂质。常用于纯化去除rRNA后的总RNA样本,体外转录的RNA产物,RNA标记产物以及合成的RNA等。纯化后的RNA适用于RNA文库构建、RT-PCRqRT-PCR、芯片分析、Northern BlotRNAi等实验。

    运输与保存方法

    冰袋运输。2-8℃存,效期一年。避免冷冻!

    使用方法

    所需额外试剂:

    100% 乙醇,Nuclease-free水,磁力架,Nuclease-free离心管。

    实验前准备:

    1)将RNA clean beads 4 ℃取出,平衡至室温(约30 min)。

    2)在一个Nuclease free PCR管中,用Nuclease-free水将0.5-5 μgRNA稀释至50 μL

    RNA纯化:

    1)颠倒或涡旋振荡使磁珠充分混匀,吸取磁珠(100 μL)加入总RNA样品中(50 μL),用移液器吹打6次充分混匀。

    2)室温孵育5 min,使RNA结合到磁珠上。

    3)将样品置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心移除上清。

    4)保持样品置于磁力架上,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇,漂洗磁珠,室温孵育30 s,小心移除上清。

    【注】1漂洗时使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鲜配制,以防止引入RNase酶导致RNA降解。

          2建议在该轮漂洗后室温静置2 min,再进行下一轮漂洗,有助于提升RNA回收效率。

    5)重复步骤4,共漂洗2次。

    6)保持样品始终处于磁力架上,开盖空气干燥磁珠5 min

    【注】磁珠开盖晾干时要避免过分干燥,如果磁珠出现龟裂,则提示磁珠过分干燥,此时RNA的洗脱效率会降低。

    7)将样品从磁力架上取出,加入21 μL Nuclease-free 水,用移液器吹打6次以充分混匀,室温静置5 min

    8)将样品置于磁力架5 min,待溶液澄清后,小心转移上清20 μL至一个新的Nuclease-free PCR管中。

    【注】建议转移上清时留2-3 μL液体,以免吸到磁珠影响后续实验。得到的RNA极不稳定,建议尽快进入下一步。若

    要保存,请置于-80保存

     注意事项

    1)磁珠使用前务必平衡室温后混匀,否则可能影响样品的回收效率。

    2)操作过程要严格保证无RNase酶和核酸污染。

    380%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率。

    4)本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。

    5)为了您的安全和健康,请穿戴实验服并戴一次性手套操作。

    结果展示:

    使用总RNA纯化试剂盒纯化前后,RNA样品qRT-PCR Ct值变化

    RNA样品

    小鼠

    拟南芥

    检测基因

    Gapdh

    β-actin

    Gapdh

    β-actin

    PP2A

    TUB2

    纯化前Ct

    12.92

    12.36

    18.74

    18.53

    24.33

    22.2

    纯化后Ct

    12.32

    11.89

    17.62

    17.91

    23.38

    21.35

    【注】使用Hieff NGSTM RNA Cleaner可以有效去除影响RT-PCR的抑制剂,让检测结果更加真实。

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